超微量吸光度分光光度計在與(yu) 蛋白質分析、提取和純化相關(guan) 的實驗室和分析機構中無處不在。生物化學和生命科學應用中蛋白質濃度測量的兩(liang) 種技術是DeNovix的DS-11係列分光光度計/熒光計和賽默飛世爾科技的NanoDrop™係列儀(yi) 器。這些分析工具中的每一種都能夠實現蛋白質定量...
對於(yu) 細胞學染色,您實際上是在三種蘇木精染色之一之間進行選擇:Gill1X蘇木精、Gill2X蘇木精和Harris蘇木精,酸化。以下是您如何為(wei) 細胞學染色選擇最佳蘇木精,以及實驗室技術人員選擇的兩(liang) 種最常見染色的方案。識別細胞學標本中的癌細胞、感染、炎症或其他細胞異常一般來說,漸進式吉爾蘇木精適合評估細胞學標本。最常見的是,我們(men) 推薦Gill1X,因為(wei) 它被認為(wei) 是Gill蘇木精染色劑中最淺的染色劑。它可以補充OG和EA染色,而不會(hui) 過度染色標本。有時,我們(men) 發現Gill2X蘇木精(例如當您...
分子克隆是分子生物學中用於(yu) 組裝重組DNA分子的一組實驗方法。基於(yu) 質粒的克隆包括4個(ge) 主要步驟:插入DNA製備載體(ti) DNA製備插入片段與(yu) 載體(ti) 的連接轉化為(wei) 感受態細胞在下麵的示例中,我們(men) 將描述如何使用SgfI和MluI將目標插入片段亞(ya) 克隆到載體(ti) 中。插入DNA製備對含有插入片段的載體(ti) 進行限製性消化用相應的限製性內(nei) 切酶消化含有插入片段的載體(ti) DNA。對於(yu) 我們(men) 的示例,使用的限製性位點是SgfI和MluI位點。OriGene擁有全基因組cDNA表達載體(ti) 。在瓊脂糖凝膠上運行消化的插入DNA以檢查大...
蛋白質印跡是研究實驗室普遍使用的一種技術,用於(yu) 研究感興(xing) 趣的蛋白質。蛋白質印跡用於(yu) 抗體(ti) 驗證、蛋白質-蛋白質相互作用研究以及許多其他應用。1然而,生成可解釋的蛋白質印跡結果可能具有挑戰性。以下是一些常見問題以及解決(jue) 方法。高背景可能是由於(yu) 嚐試這個(ge) 高抗體(ti) 濃度使用一抗和二抗進行滴定。包括已知的蛋白質對照。封閉液使用新鮮的封閉液,增加封閉時間/溫度,嚐試不同的封閉劑。印跡在封閉/洗滌過程中幹燥確保膜在封閉和清洗步驟中被充分覆蓋。洗得不夠增加洗滌次數和洗滌液體(ti) 積。確保至少洗滌3次,每次5分...
GreenqPCRMastermixHighROX針對塊循環儀(yi) 中的qPCR(實時)PCR進行了優(you) 化,特別是來自AppliedBiosesystems設備。含有500nMROX的GreenqPCR主混合物包含嵌入熒光染料和執行定量PCR所需的最佳量的所有必需成分。GenaxxonGreenMasterMix中使用的化學修飾SuperHotTaq聚合酶的優(you) 點:用於(yu) 室溫設置的熱啟動技術無需在冰上移液無需立即進一步處理(PCR)。移液的PCR混合物可在室溫下保存最多3天。還可以擴增富含G...
轉染是通過非病毒方式將任何核酸分子引入培養(yang) 的真核細胞中。過去,它通常僅(jin) 用於(yu) 指代DNA,但隨著RNAi和最近CRISPR等應用的開發,這種情況發生了變化。盡管將基因傳(chuan) 遞到細胞的方法有很多,但目前研究人員使用三種高度認可的方法:rabet雷竞技、電穿孔(基因電轉移)和病毒轉導。最終目標是將核酸輸送到細胞中,通過外源基因的表達或內(nei) 源基因的敲低來研究基因功能。基因表達操控是藥物開發、癌症研究、基因治療和組織工程等研究領域的核心技術。真核細胞的化學轉染試劑與(yu) 核酸結合形成帶正電荷的複合物。2)將...
弱染色或無染色來源解決(jue) 方案脫蠟不充分延長切片脫蠟時間或更換新鮮二甲苯無活性的一抗更換新一批抗體(ti) 由於(yu) 儲(chu) 存不當,抗體(ti) 無法發揮作用將抗體(ti) 分裝成較小的體(ti) 積並儲(chu) 存在冰箱中(-20至-70°C),並避免重複凍融循環。或根據製造商的說明儲(chu) 存抗體(ti) 。抗體(ti) 濃度太低增加一抗和/或二抗的濃度。或者運行連續稀釋測試以確定提供最佳信噪比的最佳稀釋度抗體(ti) 孵育時間不足增加抗體(ti) 孵育時間組織固定不充分或不正確增加後固定時間或嚐試不同的固定劑組織過度固定減少後固定的持續時間。如果組織已經過度固定,請執行適當或推薦...