超微量吸光度分光光度計在與(yu) 蛋白質分析、提取和純化相關(guan) 的實驗室和分析機構中無處不在。生物化學和生命科學應用中蛋白質濃度測量的兩(liang) 種技術是 DeNovix 的 DS-11 係列分光光度計/熒光計和賽默飛世爾科技的 NanoDrop™係列儀(yi) 器。這些分析工具中的每一種都能夠實現蛋白質定量和質量測量,並具有出色的檢測限。
Thermo Fisher NanoDrop™係列儀(yi) 器開創了現代微量分析技術,用於(yu) 測量 1-2 μL 範圍內(nei) 樣品中的蛋白質濃度。Thermo Fisher NanoDrop™儀(yi) 器依靠液體(ti) 的表麵張力,利用光學基座將微量樣品拉伸到色譜柱中並進行吸光度測量。
DeNovix DS-11 係列是一款一體(ti) 化超微量紫外-可見分光光度計和熒光計。該儀(yi) 器擁有靈敏的紫外-可見光 (UV-Vis) 分析功能,具有全光譜功能,有助於(yu) 快速測量蛋白質濃度。DS-11 係列采用樣品保留原理,稱為(wei) Bridge Testing™ 驗證,可提高納米體(ti) 積蛋白質分析的準確性。
Thermo Fisher NanoDrop™ 技術使用基座測量技術進行蛋白質濃度測量。將樣品液滴直接移液到分光光度計的下基座上,當上表麵與(yu) 樣品接觸時形成色譜柱,然後分開,依靠表麵張力保持色譜柱完整性。調整上基座的位置以設置光程(光穿過樣品的距離),隨後可以使用氙氣手電筒和線性電荷耦合器件 (CCD) 陣列光譜儀(yi) 進行蛋白質濃度測量。
該技術的主要缺點是由於(yu) 樣品柱破損而可能導致錯誤測量。Thermo Fisher NanoDrop™分光光度計對拉伸樣品的依賴對於(yu) 蛋白質樣品來說可能存在問題,因為(wei) 所使用的緩衝(chong) 液會(hui) 產(chan) 生低表麵張力。這導致許多實驗室認為(wei) 微量分析不適合蛋白質定量。
相比之下,DS-11 係列采用 SmartPath™ 技術設計,並經過 Bridge Testing 驗證。與(yu) 拉伸樣品相比,這種測量係統可以壓縮樣品,並且不依賴於(yu) 樣品表麵張力。它還可以原位檢測並自動補償(chang) 未橋接的樣品條件,確保蛋白質濃度結果的準確性。
DS-11 FX+ 配備了三種不同的測量模式,適用於(yu) 蛋白質濃度測量,包括:純化蛋白質;細胞和組織提取物以及低濃度樣品。這些模式是:
蛋白質 A280:使用紫外-可見光掃描並測量 280 nm 處的蛋白質吸光度
比色法:使用 Bradford、BCA 和 Pierce 660 等常見分析方法測量蛋白質濃度
熒光蛋白檢測:用於(yu) 靈敏和特異性的蛋白定量
如果您想了解有關(guan) 蛋白質樣品微量分析的更多信息,歡迎谘詢