超微量吸光度分光光度計在與(yu) 蛋白質分析、提取和純化相關(guan) 的實驗室和分析機構中無處不在。生物化學和生命科學應用中蛋白質濃度測量的兩(liang) 種技術是DeNovix的DS-11係列分光光度計/熒光計和賽默飛世爾科技的NanoDrop™係列儀(yi) 器。這些分析工具中的每一種都能夠實現蛋白質定量...
脂轉染是一種基於(yu) 脂質的轉染該技術屬於(yu) 生化方法,還包括聚合物、DEAE葡聚糖和磷酸鈣。脂轉染原理是將核酸與(yu) 陽離子脂質製劑結合起來。由此產(chan) 生的分子複合物(稱為(wei) 脂質複合物)隨後被細胞吸收。脂轉染的主要優(you) 點是效率高、能夠在多種細胞類型中轉染所有類型的核酸、易於(yu) 使用、重現性好和低毒性。此外,該方法適用於(yu) 所有轉染應用(瞬時轉染、穩定轉染、共轉染、反向轉染、順序轉染或多重轉染……)、高通量篩選測定,並且在一些體(ti) 內(nei) 模型中也顯示出良好的效率。它是如何工作的?用於(yu) 脂轉染的脂質試劑通常由合成的陽離...
i-MICST™技術(集成磁性免疫細胞分選和轉染/轉導)是一個(ge) 新平台,允許直接在磁性細胞純化柱上對細胞進行基因修飾。該技術將細胞分離和基因修飾結合在一個(ge) 簡單、高效和可靠的集成係統中。專(zhuan) 為(wei) i-MICST™技術而設計,病毒-MICST™試劑可以直接在磁性細胞純化柱上高效、特異性地轉導靶細胞。我們(men) 專(zhuan) 為(wei) 幹細胞設計,開發了Viro-MICST幹轉導增強劑。為(wei) 什麽(me) 使用Viro-MICST™?與(yu) 常規轉導方法相比,Viro-MICST&trad...
肌苷單磷酸脫氫酶(IMPDH)(EC1.1.1.205)催化肌苷5'-單磷酸(IMP)轉化為(wei) 黃苷5'-單磷酸(XMP),這是鳥苷生物合成和鳥嘌呤庫的關(guan) 鍵步驟核苷酸。在人類中,IMPDH是多種治療應用(癌症、免疫性疾病......)的經過驗證的靶點。多種IMPDH抑製劑,包括重磅藥物(例如CellCept®),已顯示出其臨(lin) 床功效。除了核苷(或NAD)類似物外,新的化學實體(ti) (NCE)已被確定為(wei) 有效的IMPDH抑製劑,目前正在研究中。已知哺乳動物和細菌IMPDH具有顯著不同...
世界各地實驗室中常用的過程之一是電泳,但很多人仍然對該過程及其工作原理存有疑問。電泳是一個(ge) 複雜的過程,但對於(yu) 實驗室研究至關(guan) 重要。電泳是一種實驗室技術,用於(yu) 根據大小分離DNA、RNA和蛋白質等分子。凝膠電泳通過施加電流促進帶電分子通過凝膠的遷移。當電流施加到凝膠上時,凝膠中的顆粒根據其電荷進行遷移。帶負電的顆粒從(cong) 帶正電的顆粒移動到凝膠的另一端。較小的分子比較大的分子遷移速度更快,因此電泳可以根據大小分離分子。此過程在各種實驗室應用中至關(guan) 重要。它使研究人員能夠區分不同大小的DNA...
裂解緩衝(chong) 液:為(wei) 了準備在凝膠上運行的樣品,需要裂解細胞和組織以釋放感興(xing) 趣的蛋白質。這會(hui) 溶解蛋白質,使它們(men) 可以單獨遷移通過分離凝膠。我們(men) 使用RIPA緩衝(chong) 液(beyotimeP0013B)來提取全細胞提取物和膜結合蛋白。蛋白酶和磷酸酶抑製劑:一旦發生裂解,蛋白水解、去磷酸化和變性就開始。如果樣品始終保存在冰上或4°C下,並且將適當的抑製劑新鮮添加到裂解緩衝(chong) 液中,這些事件可以大大減慢。Pmsf是我們(men) 經常使用的蛋白酶抑製劑。組織裂解液的製備用幹淨的工具解剖感興(xing) 趣的組織,最好在冰上,並盡...
抗體(ti) 驗證是關(guan) 鍵!以下是應對您的抗體(ti) 執行的最基本的驗證步驟:肽產(chan) 生的抗體(ti) -免疫原驗證將肽序列與(yu) UniProt數據庫進行比對,看看它是否僅(jin) 與(yu) 其目標具有同一性。肽序列與(yu) 免疫原的蛋白質序列之間的同一性為(wei) 85%或更高的任何蛋白質都可以被該抗體(ti) 檢測到。不幸的是,確切的肽序列並不總是可用,但肽序列周圍的氨基酸範圍應該是可用的。炸毀該地區也有幫助。所有Biorbyt的免疫原都會(hui) 被傳(chuan) 輸回UniProt數據庫,以確保它們(men) 僅(jin) 檢測到其設計針對的蛋白質。抗體(ti) 的應用驗證如果一種抗體(ti) 據稱適用於(yu) 蛋白質印跡(...