什麽是轉染？

轉染是通過非病毒方式將任何核酸分子引入培養(yang) 的真核細胞中。過去，它通常僅(jin) 用於(yu) 指代 DNA，但隨著 RNAi 和最近 CRISPR 等應用的開發，這種情況發生了變化。盡管將基因傳(chuan) 遞到細胞的方法有很多，但目前研究人員使用三種高度認可的方法：rabet雷竞技、電穿孔（基因電轉移）和病毒轉導。最終目標是將核酸輸送到細胞中，通過外源基因的表達或內(nei) 源基因的敲低來研究基因功能。基因表達操控是藥物開發、癌症研究、基因治療和組織工程等研究領域的核心技術。

真核細胞的化學轉染

試劑與(yu) 核酸結合形成帶正電荷的複合物。 2) 將複合物添加到細胞中，並通過靜電相互作用與(yu) 帶負電的細胞表麵結合。 3) 細胞通過內(nei) 吞作用將複合物內(nei) 化到稱為(wei) 內(nei) 體(ti) 的膜囊泡中。 4) 試劑使內(nei) 體(ti) 膜不穩定 5) 複合物從(cong) 內(nei) 體(ti) 中逸出並釋放細胞質中的核酸貨物（siRNA、miRNA 或大 RNA 通常在細胞質中活躍）。 6) DNA 必須定位於(yu) 細胞核，基因表達盒在細胞核中進行轉錄。 

化學轉染

使用化學轉染試劑的轉染依賴於(yu) 靜電相互作用來與(yu) 核酸結合並靶向細胞膜。這可以通過磷酸鈣、聚陽離子和脂質體(ti) 等化合物或陽離子脂質、聚合物、樹枝狀聚合物和納米顆粒等更先進的技術來實現。

使用磷酸鈣進行遞送是將核酸引入細胞的最古老且便宜的方法。該技術在一些易於(yu) 轉染的細胞係中效果良好，但無法傳(chuan) 遞到更具耐藥性的細胞，需要大量 DNA，並且通常缺乏重現性。

為什麽轉染很重要？

將外源核酸輸送到細胞中的能力使研究人員能夠研究基因表達（包括 CRISPR/Cas9）、RNAi 基因沉默並生成穩定的細胞係。或者，生產(chan) 細胞可用於(yu) 病毒生產(chan) 、抗體(ti) /蛋白質生產(chan) 和基因治療。

成功轉染的基礎知識

核酸的成功遞送受到幾個(ge) 常見因素的影響，包括細胞傳(chuan) 代次數、細胞匯合度、DNA 質量、DNA:試劑比例、複合物形成時間和轉染後孵育時間。