植物基因組DNA快速提取試劑

植物基因組DNA快速提取試劑

特*配方的植物 DNA 抽提液（添加多種針對植物特點的多糖、多酚去除成份）迅速裂解細胞和滅活細胞內(nei) 核酸酶，隻需一步離心即可去除多糖、多酚和蛋白，取上清所得基因組 DNA 用異丙醇沉澱，再通過乙醇漂洗等步驟得到純淨的 DNA。

注意事項（實驗前請首先閱讀這部分！）1.所有的離心步驟均在室溫完成，使用離心力可以達到13,000×g 的高速離心機。2.開始實驗前將需要的試劑水浴先預熱到65℃備用，Rnase A（10mg/ml）請自備，TE或者無酶水請自備。3.不同來源的植物組織材料中提取的DNA 的量會(hui) 有差異，一般100mg新鮮組織典型產(chan) 量可達3-25ug。4.可以按比例放大提取的體(ti) 係。 

操作步驟* 將 DNA 提取試劑放置在 65℃預熱。1.加熱 DNA 提取試劑到 65℃。2.取50-100 mg植物新鮮組織或30mg幹重組織在研缽中加入液氮充分碾磨成細粉，或用研磨儀(yi) 研磨（可以加入預熱的 DNA 提取試劑研磨）。3.轉移細粉到一個(ge) 1.5 ml 離心管中，加入 1ml~1.2ml 預熱好的 DNA 提取試劑，再加入 10ul RNase A 劇烈渦旋振蕩混勻 1 分鍾，65℃水浴 30分鍾。4.將離心管轉入離心機中 13,000×g 室溫離心 3 分鍾。下麵有兩(liang) 種抽提方法：1）無酚氯仿提取法：a.小心吸取 800ul 上清到一個(ge) 新的 2ml 離心管，注意不要吸到界麵物質，加入 1.2ml 異丙醇混合均勻，13,000×g 離心 2 分鍾。b.小心倒掉上清，注意不要倒掉沉澱，加入 1ml 的 70%乙醇震蕩漂洗DNA，13,000×g 離心 2 分鍾沉澱 DNA，棄上清。c.重複步驟 b。d.用槍盡可能吸取多餘(yu) 的乙醇（注意不要將沉澱的 DNA 吸走），室溫晾 2 分鍾左右使乙醇揮發，加入 100ul TE 溶解 DNA。可能會(hui) 有部分沉澱無法溶解，可以離心後取上清。e.DNA 可以存放在 2-8℃,如果要長時間存放，可以放置在-20℃。2）酚氯仿提取法：a.轉移第 4 步 800ul 上清到一個(ge) 新的 2ml 離心管，加入等體(ti) 積的酚：氯仿：異戊醇=25：24：1 的混合液，渦旋振蕩 1min，室溫放置 5min。b.13000×g 離心 2 分鍾，小心吸取上清到一個(ge) 2ml 離心管，注意不要吸到界麵物質，與(yu) 等體(ti) 積異丙醇混合均勻，13,000×g 離心 2 分鍾。c.小心倒掉上清，加入 1ml 的 70%乙醇漂洗 DNA，13,000×g 離心 2分鍾。d.重複步驟 c。e.用槍盡可能吸取多餘(yu) 的乙醇，室溫2分鍾左右使乙醇揮發，加入100ulTE 溶解 DNA。f.DNA 可以存放在 2-8℃,如果要長時間存放，可以放置在-20℃。

保存條件：室溫

本產(chan) 品僅(jin) 供科研使用，請勿用於(yu) 臨(lin) 床診斷及其他用途

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