詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個月 |
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應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,綜合 |
快捷型植物基因組 DNA 提取試劑盒
適用範圍:植物 DNA 提取試劑盒組分:Buffer FA 80mlBuffer FB 28mlBuffer GE 20mlRnase A(10 mg/ml) 1.2ml
保存條件:Buffer GE 4°CRnase A 4°C其它組分室溫保存
本試劑盒采用特*的緩衝(chong) 液係統,特別適合從(cong) 植物幹粉或者新鮮植物材料中提取 基因組 DNA。無需酚/氯仿抽提,使用安全方便,可***限度去除雜質蛋白及細胞中 其他有機化合物。對樣品的起始重量沒有限製,實驗者可根據自己的需求靈活調整。
提取的基因組 DNA片段大,純度高,質量穩定可靠。 使用本試劑盒回收的 DNA 可適用於(yu) 各種常規操作,包括酶切、PCR、文庫構建、 Southern雜交等實驗。
產(chan) 品特點簡單快速:1h 內(nei) 即可獲得超純的基因組 DNA。廣泛:適用於(yu) 各種植物組織。超純:獲得的 DNA 純度高,可直接用於(yu) PCR、酶切、雜交等分子生物學實驗。
注意事項1.樣品應避免反複凍融,否則會(hui) 導致提取的 DNA 片段較小且提取量也下降。2.Buffer FA 可能會(hui) 發黃,並不影響提取效果。3.若緩衝(chong) 液 FA 或 FB 有沉澱析出,可在 37℃水浴溶解,搖勻後使用。4.所有離心步驟均為(wei) 使用台式離心機,室溫下離心。操作步驟1.取植物新鮮組織 100 mg 或幹重組織 20 mg,加入液氮充分碾磨。加入 400ul Buffer FA 和 6ul 的 Rnase A(10 mg/ml),旋渦振蕩 1min,室溫放置 10min。注意:由於(yu) 植物材料多樣性非常豐(feng) 富,所取實驗材料的最適量需根據材料的不同,或相同材料的不同組織等進行摸索。。2.加入 130ul Buffer FB,充分混勻,渦旋振蕩 1min。3.14,000×g 離心 3min,將上清轉移至新的離心管中。4.將上清液再次 14,000×g 離心 5min,將上清轉移至新的離心管中。注意:此步驟目的為(wei) 去除上清液中的沉澱雜質,使提取基因組 DNA 純度更高。5.向上清液中加入 0.7 倍體(ti) 積的異丙醇,充分混勻,此時會(hui) 出現絮狀基因組 DNA。(例如 500ul 的上清液加 350ul 異丙醇),13,000×g 離心 2 min,棄上清,保留沉澱。6.加入 600ul 70%乙醇,渦旋振蕩 5sec,13,000×g 離心 2 min,棄上清。7.重複步驟 6。8.開蓋倒置,室溫 5-10 min,晾幹殘餘(yu) 的乙醇。注意:乙醇的殘留會(hui) 影響後續的酶反應(酶切、PCR 等)實驗。9.加入適量 Buffer GE,65℃水浴 10-60 min 溶解 DNA,其間顛倒混勻數次助溶。最終得到 DNA 溶液。DNA 濃度及純度檢測得到的基因組DNA片段的大小與(yu) 樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關(guan) 。回收得到的 DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與(yu) 純度。DNA 應在 OD260 處有顯著吸收峰,OD260 值為(wei) 1相當於(yu) 大約 50ug/ml雙鏈 DNA、40 ug/ml 單鏈 DNA。OD260/OD280 比值應為(wei) 1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩衝(chong) 液,而使用 ddH2O,比值會(hui) 偏低,因為(wei) pH 值和離子存在會(hui) 影響光吸收值,但並不表示純度低。
本產(chan) 品僅(jin) 供科研使用,請勿用於(yu) 臨(lin) 床診斷及其他用途
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