脂蛋白酯酶（LPL）測試盒

脂蛋白酯酶（LPL）測試盒

微量法100T/48S

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi)

脂蛋白酯酶是脂肪細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、乳腺細胞及巨噬細胞等實質細胞合成的一種酶，可催化甘油三脂水解為(wei) 脂肪酸和單酸甘油酯，以供組織氧化供能和貯存，並在不同的組織表現出不同的生理意義(yi) 。

測定原理

脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕櫚酸酯產(chan) 生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀(yi) 器

天平、冷凍離心機、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板。

試劑組成和配製    

試劑一：液體(ti) 105mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體(ti) 4mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體(ti) 10mL×1瓶，4℃保存。

樣品處理

1. 組織：按照質量（g）：試劑一體(ti) 積(mL)為(wei) 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL試劑一）加入試劑一，冰浴勻漿後於(yu) 4℃，10000g離心10min，取上清待測。

2. 細胞：按照細胞數量（104個(ge) ）：試劑一體(ti) 積（mL）為(wei) 500~1000：1的比例（建議500萬(wan) 細胞加入1mL試劑一）加入試劑一，冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然後於(yu) 4℃，10000g離心10min，取上清待測。

3. 血清：直接測定。

測定操作

計算公式

1. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線：y= 0.0581x -0.0169，R2=0.9982

1．按照蛋白濃度計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每毫克蛋白每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.0581×V反總÷（V樣×Cpr）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷Cpr

2．按照樣本質量計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每克組織每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/g 鮮重）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T

= 17.21×（△A+0.0169）÷W

3．按照細胞數量計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每104個(ge) 細胞每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷（V樣×細胞數量÷V樣總）÷T

                                        = 17.21×（△A+0.0169）÷細胞數量

4．按照液體(ti) 體(ti) 積計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每毫升血清每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/mL）=（△A+0.0169）÷0.0581×V反總÷V樣÷T

                                 = 17.21×（△A+0.0169）

V反總：反應總體(ti) 積，0.2mL；V樣：反應體(ti) 係中加入樣本體(ti) 積，0.02mL；W：樣本質量，g；V樣總：加入提取液體(ti) 積，1mL；T：反應時間，10min

b．用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線：y= 0.029x -0.0169，R2=0.9982

1．按照蛋白濃度計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每毫克蛋白每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/mg prot）= （△A+0.0169）÷ 0.029×V反總÷（V樣×Cpr）÷T

= 34.42×（△A+0.0169）÷Cpr

2．按照樣本質量計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每克組織每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/g 鮮重）=（△A+0.0169）÷0.029×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T

= 34.42×（△A+0.0169）÷W

3．按照細胞數量計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每104個(ge) 細胞每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/104 cell）= （△A+0.0169）÷0.029×V反總÷（V樣×細胞數量÷V樣總）÷T

                                        =34.42×（△A+0.0169）÷細胞數量

4．按照液體(ti) 體(ti) 積計算

酶活性定義(yi) ：在45℃，pH7.5條件下，每毫升血清每分鍾水解產(chan) 生1μmol 4-硝基苯酚為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

LPL活性（μmol /min/mL）=（△A+0.0169）÷0.029×V反總÷V樣÷T

                                 = 34.42×（△A+0.0169）

V反總：反應總體(ti) 積，0.2mL；V樣：反應體(ti) 係中加入樣本體(ti) 積，0.02mL；W：樣本質量，g；V樣總：加入提取液體(ti) 積，1mL；T：反應時間，10min

注意事項

1. 試劑三加入混勻後靜置兩(liang) 分鍾立即測定，否則影響吸光值。

2. 吸光值過高或者測定結果不穩定，則將酶液進行適當的稀釋，並在計算公式中乘以稀釋倍數。

paybet雷竞技

1. 國內(nei) 試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾(zhong) 多有名生命科學領域的研究試劑、儀(yi) 器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED Biosesystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosesolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產(chan) 品都提供售後服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為(wei) 客戶全麵解決(jue) 實驗、生產(chan) 、開發需求。公司整合國際與(yu) 國內(nei) 資源，加強網絡建設，提高公司內(nei) 部運作效率，為(wei) 客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為(wei) 客戶提供優(you) 惠的價(jia) 格。

脂蛋白酯酶（LPL）測試盒