土壤汞（SHg）濃度測試盒

土壤汞（SHg）濃度測試盒

微量法 100T/96S

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi) ：

土壤汞汙染能夠通過食物鏈傳(chuan) 遞和富集，對植物、動物和人類健康產(chan) 生威脅。礦山開發、工業(ye) 加工、農(nong) 業(ye) 生產(chan) 和生活垃圾常常造成土壤汞汙染，因此評價(jia) 和防止土壤重金屬汙染常常需要測定土壤汞含量。

測定原理：

土壤經消化後，汞以Hg2+離子形式存在；Hg2+能與(yu) 二硫腙生成橙色絡合物，溶於(yu) 三氯*烷後，在490nm測定吸光度，即可計算S-Hg含量。

自備儀(yi) 器和用品：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、可調式移液槍、100目篩（可更小）、濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸、蒸餾水。

試劑組成和配製：

標準品：液體(ti) ×1支，4nmol/mL Hg標準液，4℃保存。

試劑一：自備。在該試劑瓶中加入52mL蒸餾水，36 mL濃鹽酸，12mL濃硝酸，混勻，4℃避光保存。

試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨(lin) 用前加18.4 mL蒸餾水充分溶解。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨(lin) 用前加3 mL蒸餾水充分溶解。

試劑四：粉劑×1支，4℃保存。臨(lin) 用前加1.5 mL蒸餾水充分溶解。

試劑五：粉劑×1瓶，4℃保存。臨(lin) 用前加5.2 mL蒸餾水充分溶解。

試劑六：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨(lin) 用前加20 mL三氯*烷充分溶解。

S-Hg檢測：

1. 分光光度計/酶標儀(yi) 預熱30 min，體(ti) 積波長到490 nm，三氯*烷調零。

2. 樣品管：風幹的土壤，過100目篩後精確稱取0.1 g左右，裝入EP管；加入1 mL試劑一，充分混勻後沸水浴消化60 min。取出冷卻後室溫8000g離心10min，吸取20 μL上清液加入新的EP管；再先後加入180 μL蒸餾水和20 μL濃硫酸，混勻；最後加入180 μL試劑二，混勻後40℃水浴24h，期間震蕩數次。

2. 標準管：取EP管，加入20 μL標準液，180 μL蒸餾水和20 μL濃硫酸，混勻；最後加入180 μL試劑二，混勻後40℃水浴24h，期間震蕩數次。

3. 加入20 μL試劑三，震蕩直到無色；開蓋靜置30min，期間搖蕩數次，以排出氣體(ti) 。

4. 加入10 μL試劑四，充分混勻後靜置5min；加入50μL試劑五，蓋緊後震蕩至少1min，靜置10min以分層。

5. 小心吸取20 μL下層溶液，加入200 μL試劑六，震蕩使無色，靜置10 min以分層。

6. 小心吸取140 μL下層溶液，加入微量玻璃比色皿/96孔板，於(yu) 490nm處比色，記錄各管吸光值。記為(wei) A樣品管和A標準管。

注意：標準管隻需測定一次。

S-Hg濃度計算公式：

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

Hg（nmol Hg/g 幹重）=[C標×(A測定管÷A標準管)]×V總÷V樣÷W

                     =200×(A測定管÷A標準管)÷W

C標：標準液濃度，4 nmol/mL Hg；V總：上清液總體(ti) 積，1 mL；W：土樣質量，g；V樣：加入上清液體(ti) 積，20 μL=0.02 mL。

b.使用96孔板測定的計算公式如下

Hg（nmol Hg/g幹重）=[C標×(A測定管÷A標準管)]×V總÷V樣÷W

                     =200×(A測定管÷A標準管)÷W

C標：標準液濃度，4 nmol/mL Hg；V總：上清液總體(ti) 積，1 mL；W：土樣質量，g；V樣：加入上清液體(ti) 積，20 μL=0.02 mL。

注意事項：

1、試劑一有刺激性氣味，易揮發，實驗過程中應注意佩戴口罩和手套，使用完立即蓋好蓋子，以免試劑不夠；

2、測定過程中需加入濃硫酸，加濃硫酸時需注意，避免濺到皮膚或眼睛上；

3、靜置分層後，用1mL移液槍，排除空氣後，輕輕插入下層溶液中，緩慢吸取下層溶液。

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