土壤植酸酶測試盒

土壤植酸酶測試盒

微量法100T/48S

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi)

植酸酶（phytase）是催化植酸及其鹽類水解為(wei) 肌醇與(yu) 磷酸（鹽）的一類酶的總稱，屬磷酸單酯水解酶，它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為(wei) 可供有機體(ti) 利用的有效磷，降低糞便中的磷含量，減輕對環境的汙染，改善營養(yang) 成分的吸收和利用，因此具有極其廣泛的研究和應用價(jia) 值。

測定原理

植酸酶在一定溫度和pH值條件下，水解底物植酸鈉生成無機磷與(yu) 肌醇衍生物，無機磷在酸性環境中與(yu) 鉬酸銨顯色劑反應生成藍色複合物，在700nm處有特征吸收峰，根據700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。

自備實驗用品及儀(yi) 器

天平、低溫離心機、酶標儀(yi) 、96孔板、恒溫水浴鍋，甲苯（不允許快遞）。

試劑的組成和配製

緩衝(chong) 液：液體(ti) 60mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑×1瓶，4℃避光保存，臨(lin) 用前加緩衝(chong) 液30mL配製，現用現配；用不完的試劑4℃保存一個(ge) 月。

試劑二：液體(ti) 15mL×1瓶，4℃保存。

顯色劑：粉劑×6管，4℃避光保存，臨(lin) 用前根據用量每瓶加0.4mL雙蒸水溶解，再加1.6mL試劑二混勻。

樣本處理

新鮮土樣自然風幹或37度烘箱風幹，過30~50目篩。

測定操作表

酶活性計算公式

標準曲線：y = 0.8795x + 0.0084，R2 = 0.9977；x為(wei) 標準品濃度（μmol/mL），y為(wei) 吸光值△A。

酶活性定義(yi) ：在37℃，pH5.5的條件下，每克土樣每小時從(cong) 5mmol/L的植酸鈉溶液中釋放出1μmol的無機磷為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

植酸酶活性（μmol/h /g 土樣）=（△A-0.0084）÷0.8795×V反總÷W÷T

                             =0.82×（△A-0.0084）

V反總：反應總體(ti) 積，0.52mL；T：反應時間，24h；W：樣本質量，0.03g。

注意事項

1、顯色劑需要臨(lin) 用前根據用量配製，每一瓶是10個(ge) 樣本的用量，新配製的顯色劑若有顏色則已經汙染或者試劑過期，應放棄使用。

2、ΔA線性範圍為(wei) 0.01-0.5。

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