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土壤亞硝酸還原酶(SNiR)測試盒

簡要描述:土壤亞(ya) 硝酸還原酶(SNiR)測試盒 土壤亞(ya) 硝酸還原酶(Solid-Nitrite reductase,S-NiR)試劑盒 paybet雷竞技專(zhuan) 業(ye) 實驗室產(chan) 品.為(wei) 客戶全麵解決(jue) 實驗、生產(chan) 、開發需求,提供方便、快捷的服務。

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  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-05-07
  • 訪  問  量:508

詳細介紹

品牌其他品牌供貨周期現貨
應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,製藥/生物製藥

土壤亞(ya) 硝酸還原酶(SNiR)測試盒 

微量法100T/48S

注意:正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi)

土壤亞(ya) 硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guan) 鍵酶之一,參與(yu) 亞(ya) 硝酸鹽至NO的還原反應,它的活性反映了生物降解過程中氮素的轉化效率,為(wei) 氮素轉化規律的研究提供一定的依據。

測定原理

亞(ya) 硝酸還原酶可將NO2—還原為(wei) NO,使樣品中參與(yu) 重氮化反應生成紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應土壤中亞(ya) 硝酸還原酶的活性。

自備的儀(yi) 器和用品

天平、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機。

試劑的組成和配製

試劑一:液體(ti) 4mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨(lin) 用前加4mL蒸餾水溶解。

試劑三:液體(ti) 4mL×1瓶,4℃保存。(如出現沉澱可以70-80℃加熱溶解)

試劑四:液體(ti) 10mL×1瓶,4℃避光保存。(如出現沉澱可以70-80℃加熱溶解)

試劑五:液體(ti) 10mL×1瓶,4℃避光保存。

工作液:臨(lin) 用前根據用量將試劑四和試劑五以1:1的比例混合。

樣品處理

新鮮土樣自然風幹或37度烘箱風幹,過30~50目篩。

測定操作表


空白管

對照管

測定管

風幹土樣(g)


0.02

0.02

蒸餾水(μL)


40


試劑一(μL)

40


40

試劑二(μL)

40

40

40

混勻後,25℃反應1h

試劑三(μL)

40

40

40

充分震蕩30S,10000rpm,4℃,離心10min

上清液(μL)

70

70

70

工作液(μL)

140

140

140

充分混勻,靜置3min後測定540nm處吸光值,分別記為(wei) A空白管、A對照管、A測定管。空白管隻要做一管,每個(ge) 測定管需設一個(ge) 對照管。

計算公式

a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y = 1.5562x+ 0.0088,R2 = 0.996;x為(wei) 標準品濃度(μmol/mL),y為(wei) 吸光值(A標準管-A空白管)。

酶活單位定義(yi) :每g土樣每天還原1μmol NO2ˉ 的量為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

S-NiR(μmol /d /g土樣)=[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷1.5562×V標÷W÷T

= 0.617×[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷W

T:反應時間,1h=1/24d;V標:標準液體(ti) 積,0.04mL;W:樣本質量,g。

b. 使用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y = 0.7781x+ 0.0088,R2 = 0.996;x為(wei) 標準品濃度(μmol/mL),y為(wei) 吸光值(A標準管-A空白管)。

酶活單位定義(yi) :每g土樣每天還原1μmol NO2ˉ 的量為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

S-NiR(μmol /d /g土樣)=[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷0.7781×V標÷W÷T

= 1.234×[A空白管-(A測定管-A對照管) -0.0088]÷W

T:反應時間,1h=1/24d;V標:標準液體(ti) 積,0.04mL; W:樣本質量,g。

注意事項

  1. 配製好的工作液3天內(nei) 使用完。

  2. 若吸光值超過1.5,將上清液進行適當的稀釋後再加入工作液顯色,並在計算公式中乘以稀釋倍數。

  3. 嚴(yan) 格控製顯色時間,否則會(hui) 對結果有影響。

  4. 標準曲線線性範圍為(wei) 0.03μmol/mL-1.5μmol/mL。

  5. A空白管-(A測定管-A對照管)線性範圍為(wei) 0.02-1.5。


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