土壤中性蛋白酶(SNPT)測試盒

土壤中性蛋白酶(SNPT)測試盒

微量法 100管/48樣

正式測定前務必取2-3個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定

測定意義(yi) ：

土壤蛋白酶參與(yu) 土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化，其水解產(chan) 物是高等植物的氮源之一。S-NPT在中性環境下催化蛋白質水解，與(yu) 土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關(guan) 。

測定原理：

中性條件下，S-NPT可將酪蛋白水解產(chan) 生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍；在680nm有特征吸收峰。

實驗中所需儀(yi) 器及設備：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水

試劑組成和配置：

試劑一：液體(ti) 20mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨(lin) 用前加入6ml蒸餾水充分溶解；用不完的試劑4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨(lin) 用前加入2mL試劑七，沸水浴加熱溶解，然後加入8ml試劑一，充分混勻備用，用不完的試劑4℃保存； 

試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存；臨(lin) 用前加入30ml蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；

試劑五：液體(ti) 8mL×1瓶，4℃保存；

試劑六：液體(ti) 1.5mL×1支，0.05mg/ml標準酪氨酸溶液，4℃保存；

試劑七：液體(ti) 5mL×1瓶，4℃保存；

樣品處理：

新鮮土樣自然風幹或37度烘箱風幹，過30~50目篩。

測定操作：

1、分光光度計或酶標儀(yi) 預熱30min以上，調節波長至680nm，蒸餾水調零。

2、樣本測定：

混勻後，40℃水浴30min，振蕩5-6次，使土樣與(yu) 反應液充分接觸

混勻，8000g 25℃離心10min，取上清液，在EP管中加入下列試劑

混勻，40℃水浴20min，8000g 25℃離心10min，取上清液200μL，680nm下讀取各管吸光值A

注意：標準管隻需測一次。每個(ge) 測定管設一個(ge) 對照管。

S-NPT活性計算：

單位定義(yi) ：每天每g土樣中產(chan) 生1mg酪氨酸為(wei) 一個(ge)  S-NPT活力單位。

S-NPT(mg/d/g土樣)=C標準×(A測定管-A對照管)÷A標準管×V反總÷W÷T=24×(A測定管-A對照管)÷A標準管

C標準管：標準管濃度，0.05mg/mL；V反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積，0.4mL；T：反應時間，30min=1/48d； W：樣本質量，0.02g。

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