jembio：DNA 連接酶（大腸杆菌）

jembio：DNA 連接酶（大腸杆菌）

DNA 連接酶（大腸杆菌）   DNA 連接酶（大腸杆菌）催化雙鏈 DNA 中並置的 5' 磷酸鹽和 3' 羥基粘性末端之間磷酸二酯鍵的形成。  

 描述：

 • 催化具有粘性末端的雙鏈DNA 片段之間磷酸二酯鍵的形成。 

• 5'-磷酰基與(yu) 相鄰的3'-羥基的縮合與(yu) NAD+的水解相結合。

 • 適用於(yu) 全長cDNA 的高效克隆(1, 2)。 

單位定義(yi) ：1 個(ge) 單位定義(yi) 為(wei) lambda DNA 的 Hind III 片段產(chan) 生 50% 連接所需的酶量。在 20 µl 檢測混合物中於(yu) 16°C 下孵育，DNA 末端濃度為(wei) 0.02 µM (50 µg/ml)。  儲(chu) 存條件：儲(chu) 存於(yu) -20oC。   反應緩衝(chong) 液：30 mM Tris-HCl（22°C 時 pH 8.0）、1 mM 二硫蘇糖醇、4 mM MgCl2、26 µM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白。 最佳連接溫度為(wei) 16°C。   

儲(chu) 存緩衝(chong) 液：10 mM Tris-HCl（22°C 時 pH 7.4）、50 mM KCl、0.1 mM EDTA、10 mM 硫酸銨、1 mM 二硫蘇糖醇和 50% (v/v) 甘油。   

質量控製：所有製劑均經過核酸內(nei) 切酶和核酸外切酶汙染活性測試，以及連接反應中的功能測試。 連接測定條件：30 mM Tris-HCl（22°C 時 pH 8.0）、4 mM MgCl2、1.2 mM EDTA、1 mM 二硫蘇糖醇、0.026 mM NAD+、50 µg/ml 牛血清白蛋白和 lambda DNA 的 Hind III 片段。 16°C 孵育 30 分鍾。  

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