nvigen：MagVigen™ Easy DNA Select Kit

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MagVigen™ DNA Select 納米顆粒是 DNA 純化的理想選擇。 MagVigen™ DNA Select 納米粒子能夠有效回收雙鏈和單鏈 DNA。經過短暫孵育後，MagVigen™ DNA Select 納米粒子捕獲 DNA 產(chan) 物。生成的納米顆粒-寡核苷酸複合物可以通過磁鐵與(yu) 樣品的其餘(yu) 部分分離。可以使用洗脫緩衝(chong) 液從(cong) 納米顆粒上洗脫保留的基因組材料。

MagVigen™ DNA Select 納米顆粒能夠從(cong) 檢測樣品（例如細胞裂解液）中純化 DNA 產(chan) 品，使其不含鹽和其他汙染物。純化的 DNA 產(chan) 物可通過凝膠電泳、PCR 定量和測序進行進一步分析。

DNA 選擇用於(yu) 捕獲的納米顆粒。如果 DNA 數量或樣品體(ti) 積增加，則相應放大。

產品內容：

• MagVigen DNA 尺寸選擇納米粒子

• 洗脫液：Tris (PH 8)

所需材料（不含）

• 75%乙醇

• 磁力架，目錄號 A20006

所有材料均應儲(chu) 存在 4°C 下。保質期：6個(ge) 月

DNA捕獲

1. 從(cong) 儲(chu) 存中取出 MagVigen™ DNA Select 納米顆粒溶液，並將其恢複至室溫。




2. 使用前渦旋 MagVigen™ DNA 選擇納米顆粒 10 秒。




3. 對於(yu) 每20μl 含有不超過 1,000ng DNA 的 DNA 樣品，添加40~9 μl 體(ti) 積的 Easy DNA Select 珠子。

注： MagVigen 納米粒子的體(ti) 積比為(wei) (A)2.0:1 至 (B)0.7:1：DNA 樣品可用於(yu) 分離 ≥ (A)100bp 至 (B)400 bp 的 DNA，可以測試不同的比例以達到所需的 DNA 大小選擇。

4. 渦旋或移液器吸取反應溶液以充分混合

注意： 捕獲反應期間最好不要引入氣泡。

5. 將 MagVigen™ DNA Select 納米顆粒-DNA 反應在室溫下孵育5~15 分鍾。




6. 孵育後，使用磁鐵將 DNA 捕獲的納米顆粒從(cong) 溶液中分離出來。




7. 用移液器小心地除去上清液，注意不要擾動捕獲 DNA 的納米顆粒沉澱。




8. 將磁鐵保持在適當的位置，通過添加 100μl 新鮮製備的 75% 乙醇來清洗 DNA 捕獲的納米顆粒沉澱。靜置 3 分鍾。

注意： 根據需要調整乙醇的體(ti) 積，以充分覆蓋 DNA 捕獲的納米顆粒顆粒。

9. 取出並丟(diu) 棄乙醇溶液。




10. 重複步驟8~9，總共進行兩(liang) 次洗滌。




11. 將珠子風幹 2~10 分鍾。




12. 添加 20μl 洗脫緩衝(chong) 液，從(cong) 納米顆粒中洗脫捕獲的 DNA。

注： 洗脫緩衝(chong) 液的體(ti) 積可根據需要調整。

13. 輕輕吹打混勻，室溫孵育 5 分鍾。

注意：洗脫反應過程中最好不要引入氣泡。

14. 用磁鐵將納米顆粒與(yu) 洗脫的 DNA 分離。




15. 將含有 DNA 產(chan) 物的上清液轉移至幹淨的管中。純化的 DNA 可用於(yu) 下遊應用。

    DNA 大小切割	100bp	200bp	300bp	400bp	500bp
    比率	>1.8~2.2	1.0~1.6	0.8~0.9	0.7	0.6或<0.6

    表 1. MagVigen™ 溶液與(yu) DNA 樣品溶液的比例的一般指導，以實現所需的 DNA 大小截斷（100 bp~500 bp）。人們(men) 可以滴定不同的比例來確定最佳條件。

    

圖 1顯示了通過調整珠子體(ti) 積與(yu) DNA 樣品體(ti) 積的比率得到的大小結果。使用 Themo Scientific GeneRuler 100 bp DNAladder 和 2% 瓊脂糖凝膠。

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