jenabiosescience:病毒RNA+DNA製備試劑盒-柱試劑盒Viral RNA+DNA Preparation Kit - Column Kit ——從(cong) 血液、血清、組織、細胞培養(yang) 物或拭子中基於(yu) 旋轉柱的RNA+DNA純化

Jena Biosescience由Max-Planck-Institute of Molecular Physiology(Dortmund)的一組科學家於(yu) 1998年成立，利用超過25年的學術知識為(wei) 100多個(ge) 國家的研究和行業(ye) 客戶開發創新試劑。

供一般實驗室使用。

運輸:在環境溫度下裝運

儲(chu) 存條件:在環境溫度下儲(chu) 存

保質期:12個(ge) 月

描述:
病毒RNA+DNA製備試劑盒設計用於(yu) 從(cong) 各種病原體(ti) 生物(如病毒或細菌)中快速有效地分離RNA和DNA。樣品可以是新鮮的或冷凍的血漿/血液(用除肝素以外的抗凝血劑處理)、血清、其他無細胞體(ti) 液或病原體(ti) 感染的組織。該試劑盒允許從(cong) 鼻腔或咽喉拭子中高產(chan) 量分離病毒RNA/DNA。
該試劑盒專(zhuan) 門設計用於(yu) 使用低洗脫體(ti) 積分離高質量核酸，並允許靈敏的下遊分析，包括定量PCR和RT-PCR。純化的RNA/DNA不含蛋白質和核酸酶。病毒RNA+DNA製備試劑盒使用包含離液鹽的裂解緩衝(chong) 液來滅活RNA酶/DNA酶，並使用優(you) 良的矽膠膜技術來快速純化完整的RNA/DNA。製備程序經過優(you) 化，可在30分鍾內(nei) 獲得可靠的結果。

內(nei) 容:

所需的附加材料:
96-99 %乙醇
1.5毫升試管

準備程序:
DNA純化遵循細胞裂解、RNA/DNA結合、洗滌和洗脫程序。開始前，按照數據表和瓶子上的指示，向清洗緩衝(chong) 液A和B中添加乙醇(96-99 %，不包括在試劑盒中)。請注意，洗滌緩衝(chong) 液的乙醇濃度在長期儲(chu) 存過程中可能會(hui) 降低，導致最終DNA產(chan) 量下降。
所提供的裂解緩衝(chong) 液包含載體(ti) 分子以增強RNA/DNA在柱膜上的結合。

1a從(cong) 鼻腔或咽喉拭子製備

• 轉移250微升

  裂解緩衝(chong) 液

  放進微量離心管。
• 切下帶有收集的鼻或喉細胞的棉尖，並將其置於微量管中。
• 關閉試管並渦旋15秒。
• 在室溫(20-25°C)下孵育10分鍾。
• 取下棉簽，在試管邊緣將其擠出。
• 添加250微升

  乙醇(96-99 %)

  並通過輕輕渦旋充分混合。

1b從(cong) 血漿、血清、尿液、細胞培養(yang) 上清液、無細胞液體(ti) 或病毒感染組織中製備

• 將100 μl血漿、血清、尿液、細胞培養上清液、無細胞液體或病毒感染組織轉移到1.5 ml微管中。
• 注意:較大體積(高達200 μl)的樣品可以很容易地放大，但可能需要更大的試管用於裂解程序。
• 添加250微升(或2.5倍樣品體積)的

  裂解緩衝(chong) 液.

• 渦旋15秒。
• 在室溫(20-25°C)下孵育10分鍾。
• 添加250微升(或2.5倍的樣品體積)

  乙醇(96-99 %)

  並通過輕輕渦旋充分混合。

2列裝載

• 放置a

  旋轉柱

  放入提供的2 ml收集管中。
• 旋轉溶解產物-乙醇混合物，並將溶液轉移到

  旋轉柱.

• 蓋上蓋子，離心

  旋轉柱

  轉速為13，000轉/分鍾，持續1分鍾。
• 丟棄收集管中的流通液，並將色譜柱放回同一管中。
• 注意:色譜柱儲器的最大容量為800 μl。對於更大的樣品容量，丟棄中間的流通液並再次裝載旋轉色譜柱。

3柱清洗

• 添加500微升

  洗滌緩衝(chong) 液A(加入乙醇)

  到

  旋轉柱

  並在13,000 rpm下離心1分鍾。
• 丟棄收集管中的流通液，並將旋轉柱放回同一管中。
• 添加500微升

  洗滌緩衝(chong) 液B(添加乙醇)

  並以13，000 rpm離心1分鍾。
• 注意:在第一次使用清洗緩衝液B之前，按照瓶子上的指示添加乙醇。
• 丟棄收集管中的流通液，並將旋轉柱放回同一管中。
• 以13，000 rpm的速度離心1分鍾。
• 注意:幹燥膜很重要，因為殘留的乙醇可能會幹擾下遊反應。

4洗脫

• 放置

  旋轉柱

  放入新的1.5毫升微量試管(未提供)。
• 添加40-50微升

  洗脫緩衝(chong) 液

  直接到旋轉柱的膜上。
• 注意:避免用移液管頭端接觸薄膜。
• 室溫下孵育1分鍾。
• 以13，000 rpm的速度離心1分鍾。
• 使用2-5 μl洗脫的RNA和/或DNA作為PCR或RT-PCR檢測或進一步下遊應用的模板。洗脫的RNA/DNA可以儲存在-70℃下

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