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MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit

簡要描述:MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit
MagVigen唾液DNA提取試劑盒

  • 產品型號:K61009
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-08-21
  • 訪  問  量:441

詳細介紹

品牌其他品牌貨號K61009
供貨周期現貨應用領域醫療衛生,化工,生物產業,製藥

MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit


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產品內容

  • MagVigen唾液DNA捕獲納米顆粒
  • 唾液溶解緩衝液
  • 蛋白酶K
  • 蛋白酶K緩衝液
  • 清洗緩衝液1原液
  • 洗脫緩衝液

所需材料

  • 異丙醇
  • 乙醇
  • 十二烷基硫酸鈉,16%
  • 磁性架(NVIGEN目錄號A20006)

注意:
MagVigen唾液DNA捕獲試劑盒(K61009)可以從(cong) 唾液樣本中捕獲DNA (>30bp)。

協議

  1. 準備唾液樣本:如果使用冷凍唾液,在室溫下融化。將唾液以10000x離心10分鍾,以去除任何沉澱。

  2. 製備裂解緩衝液:如果有固體,在60℃加熱幾分鍾,形成澄清溶液。

  3. 製備蛋白酶溶液:向蛋白酶K小瓶中加入蛋白酶K緩衝液。渦旋混合均勻。儲存於-20°c

  4. 準備清洗緩衝液1:根據表1計算所需的量。向每550 μl清洗緩衝液1儲備液中添加450 μl異丙醇。每次都要做緩衝。

  5. 檢查表1中的試劑使用情況。

  6. 將蛋白酶K溶液加入樣品管底部,將320 μl唾液樣品加入管中,將80μl 1x PBS加入管中。渦旋5秒鍾,以充分混合,短暫旋轉。

  7. 向試管中加入16% SDS。渦旋5秒鍾,以充分混合,短暫旋轉。

  8. 向試管中加入唾液溶解緩衝液。渦旋1分鍾以充分混合。短暫降速。在60°C的水浴中孵育30分鍾。

  9. 添加MagVigen唾液DNA捕獲納米顆粒。輕輕搖動小瓶使其分散。然後加入異丙醇,渦旋混合均勻,短暫減速,並保持低速至中速渦旋45分鍾。

  10. 將反應管放在磁性架上,沉澱珠子,直到溶液澄清(大約10分鍾,取決於磁體的強度和樣品體積)。

  11. 慢慢去除上層清液。注意不要拿走任何珠子,盡可能多地取出溶液。輕敲固體表麵上的磁性架,使殘留溶液沉澱到試管底部,去除所有上清液。

  12. 從磁鐵上取下試管,加入清洗緩衝液1。通過移液或渦旋混合。短暫降速。在磁性架上沉澱珠子(約10分鍾),去除上清液。在表麵上輕敲磁架。除去所有上清液。


    注意:

    不需要*全分散珠子。用移液器吸頭盡可能分散就可以了。

  13. 使用80%的乙醇清洗珠子沉澱。不需要*全分散珠粒。稍微向前和向後傾斜磁性架,使樣本管留在磁性架上。然後短暫旋轉,使蓋子中沒有溶液殘留。在磁性架上沉澱珠子(約3分鍾),並去除所有上清液。輕敲固體表麵上的磁性架,將上清液殘渣沉澱到試管底部。除去所有上清液。

  14. 使用80%乙醇再次清洗珠子沉澱。沉澱珠子(~ 2-3分鍾)並去除所有上清液。

  15. 將試管留在磁性架上,風幹沉澱以蒸發所有乙醇。這需要2-3分鍾。

  16. 向珠子中加入所需量的洗脫緩衝液,上下吸取,直到所有沉澱*全重新分散。將珠子分散在洗脫緩衝液中3分鍾。

  17. 短暫降速。然後將試管放在磁性支架上5分鍾。

  18. 在不幹擾磁珠沉澱的情況下收集上清液。上清液含有提取的DNA。移出DNA溶液進行下遊實驗時,將試管放在磁鐵旁邊。如果不立即使用,提取的DNA溶液可以儲存在-20℃下。

表1。每個(ge) 步驟中使用的試劑體(ti) 積。

試劑微升
蛋白酶K6
唾液320
1X PBS80
SDS (16%)25
裂解緩衝液190
磁珠28
異丙醇480
清洗緩衝液1160
清洗緩衝液2 / 3 (80%乙醇)160
洗脫示例40
總體積1.2毫升


MagVigen™ Saliva DNA Extraction Kit







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