詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
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應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,製藥/生物製藥 |
食品中亞(ya) 硝酸鹽含量測試盒
微量法100T/96S
注意:正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。
測定意義(yi) :
在食品中,亞(ya) 硝酸鹽可與(yu) 肉品中的肌紅素結合而更安定,在食品加工業(ye) 中作為(wei) 保色劑,以維持肉製品的良好外觀,並防止肉毒梭狀芽孢杆菌的產(chan) 生,提高食用肉製品的安全,但是人體(ti) 長期攝入亞(ya) 硝酸鹽過量的食品,可誘發消化係統癌變。
測定原理:
在酸性條件下,亞(ya) 硝酸鹽與(yu) 對氨基苯磺酸反應生成重氮化合物,再與(yu) N-1-萘基乙二胺形成紫紅色偶氮化合物,在540nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀(yi) 器:
天平、研缽或勻漿器、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配製:
提取液一:液體(ti) 50 mL×1瓶,室溫保存。
提取液二:液體(ti) 50 mL×1瓶,室溫保存。
提取液三:液體(ti) 50 mL×1瓶,室溫保存。
粉劑四:粉劑 100 mg ×1支,室溫保存。
試劑一:液體(ti) 10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體(ti) 10mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理:
稱取樣品約0.2g鮮重或0.05g幹重,破碎,加入0.5 mL 提取液一,沸水浴15min,冷卻至室溫,加入0.5 mL提取液二,震蕩搖勻,加0.5 mL 提取液三,用鑷子加少量粉劑四(約1 mg),靜置30min,25℃,8000g離心15 min,取上清液待測。
測定步驟和操作表:
分光光度計/酶標儀(yi) 預熱30min,調節波長至540nm,蒸餾水調零。
操作表
測定管 | 空白管 | |
蒸餾水(µL) | 70 | |
樣品(µL) | 70 | |
試劑一(µL) | 65 | 65 |
試劑二(µL) | 65 | 65 |
混勻,25℃靜置15min,於(yu) 微量石英比色皿/96孔板中檢測540nm處吸光值A。 △A=A測定 - A空白 |
注意:空白管隻需測定一次。
亞(ya) 硝酸鹽含量計算:
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線回歸方程為(wei) :y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x為(wei) 標準品亞(ya) 硝酸鈉濃度(μg/ml) y為(wei) 吸光值A。
NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(A – 0.086)÷0.234×1.5×0.6668÷W
=4.27×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體(ti) 積,1.5 mL; V樣:反應中樣品體(ti) 積,0.07mL;W:樣品質量,g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線回歸方程為(wei) :y=0.141x +0.095,R2= 0. 9991 x為(wei) 標準品亞(ya) 硝酸鈉濃度(μg/ml) y為(wei) 吸光值A。
NO2-(μg/g )=(△A-0.0002)÷0.141×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×0.6668
=(△A-0.0002)÷0.141×1.5×0.6668÷W
=7.09×(△A-0.0002)÷W
V樣總:加入提取液體(ti) 積,1.5 mL; V樣:反應中樣品體(ti) 積,0.07mL;W:樣品質量,g。
注意事項:
試劑盒2-8℃保存。
試劑對人體(ti) 有一定的危害,請穿實驗服,戴手套操作。
若檢測出得OD值在標準曲線範圍外,請將樣品進行適當的濃縮或稀釋(A540 <0.09濃縮,A540 > 1.5 適當稀釋)。
*低檢出限為(wei) 0.5μg/g。
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