蔗糖酶測試盒

蔗糖酶測試盒

微量法 100管/48樣

正式測定前務必取2-3個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定

測定意義(yi) ：

蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關(guan) 鍵酶之一，能夠水解蔗糖變成相應的單糖而被機體(ti) 吸收。

測定原理：

本試劑盒采用3.5－二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產(chan) 生的還原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5－二硝基水楊酸與(yu) 還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定範圍內(nei) 還原糖的量和反應液的顏色深度成正比。此法操作簡便、迅速、雜質幹擾較小。

所需的儀(yi) 器和用品：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、沸水浴、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配製：

提取液：液體(ti) 100mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體(ti) 2mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1支 ，4℃保存，用時加入1mL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；

試劑三：液體(ti) 3mL×1瓶，常溫保存；

樣品測定的準備： 

按照組織質量（g）：提取液體(ti) 積(mL)為(wei) 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟：

1. 分光光度計或酶標儀(yi) 預熱30min以上，調節波長至520nm，蒸餾水調零。

2. 樣本測定，（在EP管中依次加入下列試劑）：

置於(yu) 25℃準確水浴10min

混勻， 95℃水浴5min左右（蓋緊，防止水分散失），冷卻至室溫

混勻，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中測定各管520nm吸光值，ΔA=A測定-A對照，每個(ge) 測定管需設一個(ge) 對照管。

蔗糖酶活力計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 0.1296x -0.12；x為(wei) 標準品濃度（mg/mL），y為(wei) 吸光值。

2、按照蛋白濃度計算

單位定義(yi) ：每mg組織蛋白每分鍾催化水解1μg蔗糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA +0.12)÷Cpr。

3、按樣本鮮重計算

單位定義(yi) ：每g組織每分鍾催化水解1μg蔗糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

蔗糖酶活力(μg/min/g鮮重)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=771×(ΔA +0.12) ÷W。

1000：1mg/mL=1000μg/mL；V1：加入反應體(ti) 係中樣本體(ti) 積，0.03mL；V2：加入提取液體(ti) 積，1mL；T：反應時間，10min； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

b.用96孔板測定的計算公式如下

1、標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 0.0648x -0.12；x為(wei) 標準品濃度（mg/mL），y為(wei) 吸光值。

2、按照蛋白濃度計算

單位定義(yi) ：每mg組織蛋白每分鍾催化水解1μg 蔗糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.0648×V1]÷(V1×Cpr)÷T=1542×(ΔA +0.12)÷Cpr。

3、按樣本鮮重計算

單位的定義(yi) ：每g組織每分鍾催化水解1μg 蔗糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

蔗糖酶活力(μg/min/g鮮重)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.0648×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=1543×(ΔA +0.12) ÷W。

1000：1mg/mL=1000μg/mL；V1：加入反應體(ti) 係中樣本體(ti) 積，0.03mL；V2：加入提取液體(ti) 積，1mL；T：反應時間，10min； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

paybet雷竞技

1. 國內(nei) 試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾(zhong) 多有名生命科學領域的研究試劑、儀(yi) 器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED Biosesystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosesolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產(chan) 品都提供售後服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為(wei) 客戶全麵解決(jue) 實驗、生產(chan) 、開發需求。公司整合國際與(yu) 國內(nei) 資源，加強網絡建設，提高公司內(nei) 部運作效率，為(wei) 客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為(wei) 客戶提供優(you) 惠的價(jia) 格。

蔗糖酶測試盒