詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
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應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,製藥/生物製藥 |
土壤纖維素酶(SCL)測試盒
微量法 100管/48樣
正式測定前務必取2-3個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定
測定意義(yi) :
S-CL主要來源於(yu) 土壤微生物,S-CL催化農(nong) 作物秸稈產(chan) 生的葡萄糖是主要的碳源營養(yang) 物質。
測定原理:
采用蒽酮比色法測定S-CL催化纖維素降解產(chan) 生的還原糖的含量。
需自備的儀(yi) 器和用品:
酶標儀(yi) /可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑的組成和配製:
試劑一:甲苯10mL×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:液體(ti) 6mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體(ti) 40mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存; 臨(lin) 用前加入5mL蒸餾水和45mL濃硫酸充分溶解待用。
樣品處理:
新鮮土樣自然風幹或37度烘箱風幹,過30~50目篩。
加樣表和測定步驟:
對照管 | 測定管 | |
風幹土樣(g) | 0.05 | 0.05 |
試劑一 (μL) | 50 | 50 |
振蕩混勻15min | ||
試劑二(μL ) | 90 | |
試劑三(μL ) | 370 | 370 |
蒸餾水(μL ) | 180 | 90 |
37℃振蕩反應3h後,90℃水浴15min(蓋緊,防止水分散失),冷卻後
8000g 25℃離心10min,取上清,得糖化液
糖化液 (μL) | 140 | 140 |
試劑四 (μL) | 260 | 260 |
混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,測620nm下吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個(ge) 測定管設一個(ge) 對照管。
S-CL活力計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 5.018x - 0.0462;x為(wei) 標準品濃度(mg/mL),y為(wei) 吸光值。
單位的定義(yi) :每天每g土樣中產(chan) 生1mg 葡萄糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反總÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)
T:反應時間,3h=1/8d; V反總:反應體(ti) 係總體(ti) 積:0.6mL;W:樣本質量,0.05g。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 2.5090x - 0.0462;x為(wei) 標準品濃度(mg/mL),y為(wei) 吸光值。
單位的定義(yi) :每天每g土樣中產(chan) 生1mg 葡萄糖定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V反總÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)
T:反應時間,3h=1/8d; V反總:反應體(ti) 係總體(ti) 積:0.6mL;W:樣本質量,0.05g。
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