土壤多酚氧化酶（SPPO）檢測試劑盒

土壤多酚氧化酶（SPPO）檢測試劑盒

測定意義(yi) ：

S-PPO 主要來源於(yu) 土壤微生物、植物根係分泌物及動植物殘體(ti) 分解釋放，催化土壤中芳香族化合物氧化成

醌，醌與(yu) 土壤中蛋白質、氨基酸、糖類、礦物等物質反應生成有機質和色素，完成土壤芳香族化合物循環，

用於(yu) 土壤環境修複。

測定原理：

S-PPO 能夠催化鄰苯三酚產(chan) 生有色物質，後者在 430nm 有特征光吸收。

自備用品：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、台式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、yi醚 50mL（不

允許快遞）和蒸餾水。

試劑組成和配製：

試劑一：粉劑×2 瓶，4℃保存；臨(lin) 用前取一瓶，加入 7mL 蒸餾水充分溶解後待用；用不完的試劑 4℃保存

一周。

試劑二：液體(ti) 6mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：yi醚 50mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

樣品處理：

新鮮土樣自然風幹或 37 度烘箱風幹，過 30~50 目篩。

測定步驟：

1、 分光光度計或酶標儀(yi) 預熱 30min 以上，調節波長至 430nm，蒸餾水調零。

2、 加樣表

振蕩數次，室溫靜置 30min，取 200μL 上層液於(yu) 430nm 處測定吸光值 A。

（注意：1、因yi醚粘度小，易掉液，吸取前需先將槍頭在上層液裏潤洗 2~3 次，再轉移測定；2、yi醚易

揮發，轉移到 96 孔板後立即測定，最好一個(ge) 一個(ge) 測定）。

S-PPO 活力計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 8.97x -0.003；x 為(wei) 標準品濃度（mg/mL），y 為(wei) 吸光值 A。

單位的定義(yi) ：每天每 g 土樣中產(chan) 生 1mg 紫色沒食子素定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

S-PPO 活力（mg /d/g 土樣）＝(A+0.003) ÷8.97×V 反總÷W÷T=80×(A+0.003)

T：反應時間，1h=1/24d； V 反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積 0.6mL；W：樣本質量，0.02g。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 4.485x -0.003；x 為(wei) 標準品濃度（mg/mL），y 為(wei) 吸光值 A。

單位的定義(yi) ：每天每 g 土樣中產(chan) 生 1mg 紫色沒食子素定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

S-PPO 活力（mg/d/g 土樣）＝(A+0.003) ÷4.485×V 反總÷W÷T=160×(A+0.003)

T：反應時間，1h=1/24d； V 反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積 0.6mL；W：樣本質量，0.02g。

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