原果膠含量測試盒

原果膠含量測試盒

微量法100T/48S

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi)

果膠是植物細胞壁主要組成成分之一，分為(wei) 水溶性果膠和不溶性果膠，即原果膠。因其具有良好的乳化、增稠和凝膠作用，在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領域具有較廣泛的應用。

測定原理

原果膠在稀酸中水解為(wei) 可溶性果膠，並進一步轉化為(wei) 半乳糖醛酸，產(chan) 物在強酸中與(yu) 哢唑縮合生成紫紅色化合物，在530 nm處有特征吸收峰。

需自備的儀(yi) 器和用品

天平、研缽、常溫離心機、水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。

試劑的組成和配製

提取液一：液體(ti) 100mL×2瓶，4℃保存。

提取液二：液體(ti) 100mL×1瓶，4℃保存。

標準品：液體(ti) 1mL×1支，4℃保存。

試劑一：濃硫酸，自備。

試劑二：液體(ti) 2mL×1支，4℃保存。

試劑三：液體(ti) 3mL×1瓶，4℃避光保存。

樣品處理

將組織樣品搗碎，按照樣品質量(g)和提取液一體(ti) 積(mL)為(wei) 1: 20的比列（建議取約0.05g樣品，加入1mL提取液一），置於(yu) 90℃恒溫水浴鍋中浸提30min，取出冷卻後於(yu) 5000g、 25℃離心10min，去掉上清，沉澱中再加入1mL提取液一重複操作一次，離心後去上清，沉澱中加入1mL提取液二，置於(yu) 90℃恒溫水浴鍋中水解1h，取出冷卻後於(yu) 8000g、25℃離心15min，取上清液待測。

測定操作表

注意：空白管和標準管隻需測定一次。

計算公式

1. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

原果膠含量(mg /g 鮮重)= (C標準×V標) ×△A2÷△A1÷(W÷V樣總) = 0.25×△A2÷△A1÷W

C標準：標準品濃度，0.25mg/mL；V標：反應體(ti) 係中加入標準品體(ti) 積，0.02mL； V樣總：加入提取液體(ti) 積，1mL；W：樣本鮮重，g。

2. 用96孔板測定的計算公式如下

原果膠含量(mg /g 鮮重)= (C標準×V標) ×△A2÷△A1÷(W÷V樣總) =0.25×△A2÷△A1÷W

C標準：標準品濃度，0.25mg/mL；V標：反應體(ti) 係中加入標準品體(ti) 積，0.02mL； V樣總：加入提取液體(ti) 積，1mL； W：樣本鮮重，g。

注意事項

1. 濃硫酸具有強腐蝕性，操作時需特別注意，90℃加熱取出後冷卻再打開蓋子，以防液體(ti) 飛濺燒傷(shang) 。                                若吸光值超過1，可將樣本提取液進行適當稀釋再進行測定，並在計算公式中乘以稀釋倍數。

2. *低檢出限為(wei) 10μg/g。

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