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Vero細胞係特性和應用

更新時間:2024-04-09      點擊次數:1997

Vero細胞係是一種源自非洲綠猴腎上皮細胞的永生化哺乳動物細胞模型,站在病毒學、微生物學以及細胞和分子生物學研究的前沿。它們(men) 的廣泛應用涵蓋疫苗開發、藥物篩選以及病毒和寄生蟲生物學、腫瘤免疫學和免疫治療策略的探索。

Vero細胞係的建立可以追溯到1962年,起源於(yu) 非洲綠猴的腎上皮細胞。

Vero細胞克隆及其性質

來自Vero細胞係的不同克隆顯示出區別於(yu) 原始細胞係的特征。其中,兩(liang) 個(ge) 著名的Vero細胞克隆是:

  • Vero E6細胞係:該克隆也稱為(wei) Vero C1008,來自Vero 76細胞,1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀釋技術分離。Vero E6細胞特別適合培養(yang) 複製緩慢的病毒。

  • Vero 76細胞:這些細胞起源於(yu) 1968年的一隻非洲綠猴的腎髒,保持了Vero細胞的上皮形態特征。

這些Vero細胞變體(ti) 與(yu) 親(qin) 代細胞係一起,繼續有助於(yu) 推進病毒學研究和醫學幹預措施的發展,標誌著它們(men) 在科學界的重要性。

培養(yang) 猴細胞係Vero細胞需要熟悉特定的參數,如倍增時間、接種密度和合適的生長培養(yang) 基。

  • 人口倍增時間:Vero細胞的倍增時間約為(wei) 24小時。

  • 堅持性:Vero細胞粘附在表麵上,培養(yang) 時通常形成單層。

  • 播種密度:建議從(cong) 1倍10^4 cells/cm^2.的播種密度開始為(wei) 了培養(yang) 粘附的Vero細胞,用PBS清洗它們(men) 並用Accutase處理它們(men) 以分離它們(men) 。分離後,離心細胞,將其重新懸浮在新鮮培養(yang) 基中,並將其轉移到新的培養(yang) 瓶中。

  • 生長培養(yang) 基:哈姆的F12和DMEM都是培養(yang) Vero細胞的合適培養(yang) 基。這些應補充2.5mM L-穀氨酰胺和5%胎牛血清(FBS)以支持最佳生長。培養(yang) 基應該每周更新兩(liang) 到三次。

  • 生長條件:Vero細胞在37°C的溫度和5% CO2的潮濕環境中生長旺盛。

  • 存儲(chu) :對於(yu) 長期儲(chu) 存,Vero電池應保持在低於(yu) -150°C的溫度下,要麽(me) 放在超低溫冰箱中,要麽(me) 放在液氮的蒸汽相中。

  • 冷凍過程和介質:對於(yu) 冷凍保存,使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生長培養(yang) 基作為(wei) 冷凍培養(yang) 基。采用緩慢冷凍技術,每分鍾逐漸降低1°C的溫度。

  • 解凍過程:將容器浸入37°C水浴中並輕輕攪動40-60秒,解凍Vero細胞。然後,在新鮮培養(yang) 基中稀釋細胞,離心去除冷凍保護劑,重新懸浮在新鮮生長培養(yang) 基中,並將其置於(yu) 新的燒瓶中以恢複和生長。

  • 生物安全等級:Vero細胞應在符合1級生物安全要求的實驗室中處理。

Vero細胞係在研究中的應用

Vero細胞係在細胞生物學和病毒學領域有許多研究應用。在這裏,我們(men) 討論了一些具體(ti) 的問題。


病毒研究和疫苗生產中的Vero細胞

源自非洲綠猴腎細胞的Vero細胞已成為(wei) 多種病毒疫苗生物過程開發中的主要成分,包括脊髓灰質炎病毒和日本腦炎病毒。它們(men) 在貼壁和懸浮培養(yang) 中的適應性及其廣泛的病毒支持能力,包括對小反芻獸(shou) 疫病毒等病原體(ti) 的支持能力,突出了它們(men) 在病毒分離和疫苗開發中的重要性。

許多研究利用Vero細胞生產(chan) 人類疫苗。例如,2019年發表的一項引人注目的研究證明了在黃熱病病毒滅活疫苗的開發中使用Vero細胞【2】。

Vero細胞通常用於(yu) 病毒感染研究。

Vero細胞在組織工程和上遊生物過程開發中的作用

除了疫苗生產(chan) ,Vero細胞還有助於(yu) 組織工程和更廣泛的生物過程開發領域,這強調了對其特性和應用進行持續研究的必要性。選擇合適的Vero細胞亞(ya) 係是最大限度地發揮其在生物技術和製藥工業(ye) 中的潛力的關(guan) 鍵。

Vero細胞在藥物療效和安全性測試中的應用

Vero細胞經常用於(yu) 藥物測試,以評估藥物化合物的有效性和安全性。在研究各種藥物和治療劑的細胞毒性作用時,這些細胞通常被認為(wei) 是正常腎細胞的標準模型。例如,研究比較了白骨壤植物根提取物對肝癌細胞係HepG2和猴腎上皮細胞Vero細胞的影響,發現提取物對癌細胞的損害比對正常細胞的損害更大。

Vero細胞的局限性

盡管vero細胞被廣泛使用,但它們(men) 也有其局限性,例如Vero毒素的產(chan) 生和基因組的改變可能會(hui) 影響某些應用。了解Vero細胞(包括Vero譜係F6)的特定亞(ya) 係和基因組特征對於(yu) 優(you) 化其在各種生物過程中的應用至關(guan) 重要。


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