ozbiosesciences:Magnetofection™ 技術簡述

Magnetofection™ 是一種簡單且高效的方法轉染方法可轉染原代細胞和難轉染細胞。

Magnetofection™ 的原理是將核酸、轉染試劑或病毒與(yu) 特定的磁性納米粒子結合起來。然後將所得的分子複合物濃縮並運輸到由適當磁場支持的細胞中。通過這種方式，利用施加在基因載體(ti) 上的磁力可以將所施加的全部載體(ti) 劑量非常快速地集中在細胞上，從(cong) 而使 100% 的細胞與(yu) 有效的載體(ti) 劑量接觸，並促進細胞攝取。

它是如何工作的？

磁性納米顆粒由氧化鐵製成，可生物降解，並根據應用塗有特定的專(zhuan) 有陽離子分子。它們(men) 與(yu) 基因載體(ti) （DNA、siRNA、ODN、病毒等）的結合是通過鹽誘導的膠體(ti) 聚集和靜電相互作用來實現的。然後，通過特定磁板產(chan) 生的外部磁場的影響，磁性顆粒被濃縮到細胞上。遺傳(chuan) 物質的細胞攝取是通過胞吞作用和胞飲作用這兩(liang) 個(ge) 自然生物過程來完成的。因此，與(yu) 破壞細胞膜、產(chan) 生孔洞或電擊細胞膜的其他物理轉染方法相比，膜結構和結構保持完整。然後，根據所使用的製劑，通過不同的機製將核酸釋放到細胞質中。

1. 首先是納米顆粒上包覆的陽離子聚合物引起的質子海綿效應，促進內(nei) 體(ti) 滲透膨脹、內(nei) 體(ti) 膜破壞和細胞內(nei) DNA 釋放。

2. 其次是顆粒上包被的陽離子脂質使內(nei) 體(ti) 不穩定，通過細胞負性脂質的翻轉和電荷中和將核酸釋放到細胞中。

3. 第三個(ge) 是使用病毒時通常的病毒機製。

磁性納米顆粒的生物分布

可生物降解的陽離子磁性納米粒子在推薦劑量甚至更高劑量下沒有毒性。基因載體(ti) /磁性納米顆粒複合物在 10-15 分鍾後內(nei) 化到細胞中，即比任何其他轉染方法快得多。 24、48 或 72 小時後，大多數顆粒位於(yu) 細胞質、液泡（細胞周圍結構的膜）中，偶爾位於(yu) 細胞核中。此外，磁性納米粒子不影響細胞功能。

有哪些應用？

Magnetofection™ 是適用於(yu) 所有類型核酸（DNA、siRNA、dsRNA、shRNA、mRNA、ODN...）、非病毒轉染係統（轉染試劑）和病毒的通用技術。

如何使用 Magnetofection™ 試劑？

該方案是一個(ge) 非常簡單的程序：
1. 在無血清培養(yang) 基或緩衝(chong) 液中稀釋核酸或載體(ti) ，並添加 Magnetofection™ 試劑。
2. 孵育 20-30 分鍾。
3. 將這些複合物直接添加到細胞中。
4.施加磁場（將培養(yang) 板放在磁力板上）。
5. 孵育5-20分鍾，取出磁板並培養(yang) 細胞直至測定。

需要特定的設備嗎？

Magnetofection™ 要求是磁板專(zhuan) 為(wei) 此應用而設計。磁性板是一次性購買(mai) 且可重複使用，因此您不需要與(yu) 電穿孔或基因槍等方法相反的昂貴設備。基本上，所需的磁場是由特定的磁鐵產(chan) 生的。三種磁性板可供選擇：超級磁性板、具有 96 個(ge) 磁鐵的磁性板和巨型磁性板。他們(men) 的設計允許產(chan) 生異質磁場，磁化溶液中的納米顆粒，形成非常強的梯度以吸引納米顆粒並覆蓋板的所有表麵。該板可用 70% 乙醇清洗並在培養(yang) 箱或機器人中使用。