MagVigen™ – Streptavidin DNA Capture

MagVigen鏈黴親(qin) 和素DNA捕獲納米顆粒可用於(yu) 直接從(cong) 溶液中捕獲特定的RNA或DNA序列。納米顆粒可以通過鏈黴親(qin) 和素和生物素之間的高親(qin) 和力相互作用結合到任何生物素化的DNA上。MagVigen鏈黴親(qin) 和素DNA捕獲納米顆粒可高效回收雙鏈和單鏈DNA。短時間的孵育後，DNA產(chan) 物被納米粒子捕獲。產(chan) 生的納米顆粒-寡聚物複合物可以通過磁體(ti) 與(yu) 樣品的其餘(yu) 部分分離。可以使用洗脫緩衝(chong) 液從(cong) 納米顆粒中洗脫保留的基因組材料。

MagVigen鏈黴親(qin) 和素DNA捕獲納米顆粒能夠從(cong) 分析樣品(如細胞裂解物、全血)的鹽和其他汙染物中純化DNA產(chan) 物。純化的DNA產(chan) 物可以通過凝膠電泳、PCR定量和測序進一步分析。

產品內容:

• Cat# 61002: MagVigen鏈黴親和素DNA捕獲納米顆粒

Cat# K61002還包括:

• DNA檢測緩衝液
• 結合緩衝液1
• 結合緩衝液2

所有材料應儲(chu) 存在4°c下。

保質期:6個(ge) 月

草案

DNA純化

該方案被優(you) 化用於(yu) 從(cong) 分析樣品(例如細胞裂解物、全血或血漿)中純化生物素化的DNA樣品。

DNA捕獲

製備磁珠再分散緩衝液:

1. 將600μl DNA檢測緩衝液加入1400μl H2O中，製備磁珠再分散緩衝液。

準備清洗緩衝液:

2. 將2.4毫升DNA檢測緩衝液加入17.6毫升H2O中，製備清洗緩衝液。

準備磁珠:

3. 從倉庫中取出MagVigen鏈黴親和素納米顆粒，並將其置於室溫。




4. 使用前渦旋MagVigen鏈黴親和素納米顆粒10-20秒。

對於(yu) 高達100皮摩爾的生物素化DNA，使用20μl的MagVigen鏈黴親(qin) 和素納米顆粒。

5. 取出MagVigen鏈黴親和素納米顆粒，放入幹淨的1.5毫升反應管中。




6. 使用磁鐵收集MagVigen鏈黴親和素納米顆粒，並去除上清液。

注意: 在微量離心管的側(ce) 麵應該可以看到含有深棕色納米顆粒的透明沉澱物。

7. 將納米顆粒重新懸浮在等體積的磁珠再分散緩衝液中。

雜交反應:

8. 將樣品在95°C下煮沸10分鍾，然後將樣品管放入幹冰中5分鍾，然後短暫離心。




9. 按所述順序向DNA樣品中加入DNA檢測緩衝液、結合緩衝液1、生物素化DNA捕獲寡核苷酸、結合緩衝液2。




10. 將樣品在57°C(最佳溫度應根據探針寡核苷酸長度和序列進行測試)下孵育2小時。。




11. 將樣品冷卻至室溫。

磁性Pull-Down:

12. 加入MagVigen鏈黴親和素納米顆粒，室溫下在滾筒上孵育1小時。




13. 孵育後，使用磁鐵將捕獲DNA的納米顆粒從溶液中分離出來。




14. 用移液管小心移去上清液，注意不要幹擾捕獲DNA的納米顆粒沉澱。




15. 通過將納米顆粒重新懸浮在57℃的溫洗滌緩衝液中，洗滌DNA捕獲的納米顆粒沉澱。




16. 使用磁鐵收集MagVigen鏈黴親和素納米顆粒，並去除上清液。




17. 通過將納米顆粒重新懸浮在室溫的洗滌緩衝液中來洗滌DNA捕獲的納米顆粒沉澱。




18. 使用磁鐵收集MagVigen鏈黴親和素納米顆粒，並去除上清液。

洗脫:

19. 將納米顆粒重新懸浮於10 mM Tris緩衝液中，並保持所需體積。通過在80℃溫育5分鍾進行洗脫。




20. 用磁鐵將納米顆粒從洗脫的DNA中分離出來。




21. 將含有DNA產物的上清液轉移到幹淨的試管中。純化的DNA可用於隨後的評估。

使用的試劑示例。可以滴定磁珠數量以獲得最佳性能。

MagVigen™ – Streptavidin DNA Capture