SuperStar TaqMan Mixture（With ROX）

SuperStar TaqMan Mixture（With ROX）

專(zhuan) 用於(yu) 探針法（TaqMan， Molecular Beacon 等）實時熒光定量 PCR 的預混體(ti) 係，濃度為(wei) 2×，包含 SuperStar Taq DNA Poly-merase、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+和 ROX染料， 操作簡單方便。主要用於(yu) 基因組 DNA 靶序列和 RNA反轉錄後 cDNA靶序列 檢測，如基因表達分析，拷貝數分析，SNP 基因型分析等，適用於(yu) 不同類型 探針法熒光定量。本品含有的SuperStar Taq DNA Polymerase是一種經化學修 飾的、全新高效熱啟動酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結合或引物二聚體(ti) 而產(chan) 生的非特異性擴增，酶的激 活須在 95℃下孵育 10 分鍾。該 PCR 緩衝(chong) 體(ti) 係與(yu) 熱啟動酶的組合，顯著 提高了 PCR 的擴增效率，熒光信號更強，靈敏度更高，可以檢測單拷貝的模 板。使用本產(chan) 品可以得到更廣的線性範圍，對目的基因定量更準確。所含的 ROX 染料可校正定量 PCR 儀(yi) 孔與(yu) 孔之間產(chan) 生的熒光信號誤差，適用於(yu) 以 ROX 作為(wei) 校正染料的所有熒光定量 PCR 儀(yi) 。

注意事項1. 使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，並經短暫離心後使用。2. 本產(chan) 品中含有 ROX 染料，保存本產(chan) 品或配製 PCR 反應液時應避免強光照射。3. 避免反複凍融本品，反複凍融可能使產(chan) 品性能下降。本產(chan) 品長期保存可置於(yu) -20℃，避光。如果在短期內(nei) 需要頻繁使用，可在 2-8℃保存。使用方法以下舉(ju) 例為(wei) 常規 PCR 反應體(ti) 係和反應條件，實際操作中應根據模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的改進和優(you) 化。1. PCR 反應體(ti) 係(以 50ul 反應體(ti) 係為(wei) 例)

注意：1）通常引物濃度以 0.2uM 可以得到較好結果，可以在 0.1-1.0uM 作為(wei) 設定範圍的參考。2）使用的探針濃度，與(yu) 使用的熒光定量 PCR 儀(yi) 、探針種類、熒光標記物質種類有關(guan) ，實際使用時請參照儀(yi) 器說明書(shu) ，或各熒光探針的具體(ti) 使用要求進行濃度的調節。3）通常 DNA 模板的量以 10-100ng 基因組 DNA 或 1-10ng cDNA 為(wei) 參照，因不同物種的模板中含有的目的基因拷貝數不同，可對模板進行梯度稀釋，以確定最佳的模板使用量。2. PCR反應程序注意！本產(chan) 品預變性反應必須在 95℃ 10 分鍾下完成！兩(liang) 步法 PCR：

注意：1）本產(chan) 品所采用的熱啟動酶須在預變性 95℃、10 min 條件下實現酶的活化。2）建議采用兩(liang) 步法 PCR 反應程序，若因使用 Tm 值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結果時，可嚐試進行三步法 PCR 擴增，退火溫度請以56℃-64℃的範圍作為(wei) 設定參考。

特點:高效 熱啟動適用範圍:熒光定量 PCR保存條件：-20℃避光保存

本產(chan) 品僅(jin) 供科研使用，請勿用於(yu) 臨(lin) 床診斷及其他用途

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