蔗糖含量測試盒

蔗糖含量測試盒

微量法 100管/96樣

正式測定前務必取2-3個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定

測定意義(yi) ：

蔗糖是植物光合作用的主要產(chan) 物，也是糖分運輸和儲(chu) 藏的主要形式。因此，測定蔗糖含量對於(yu) 植物糖代謝具有重要意義(yi) 。此外，蔗糖含量是飲料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳製品等產(chan) 品質量控製的重要指標之一。

測定原理：

先用堿與(yu) 樣品共熱，破壞其中的還原糖。然後在酸性條件下將蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖進一步與(yu) 間苯二酚反應，生成有色物質，在480nm下有特征吸收峰。

所需的儀(yi) 器和用品：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配製：

提取液：液體(ti)  100ml×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體(ti) 10mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：液體(ti) 2ml×1瓶，4℃保存；

試劑三：液體(ti)  20ml×1瓶，4℃保存；

試劑四：液體(ti)  6ml×1瓶，4℃避光保存；

試劑五：粉劑0.5g×1瓶，常溫保存。

蔗糖提取：

稱取0.1~0.2g樣本，常溫研碎，加入0.5mL提取液，適當研磨後快速轉移到離心管中，置於(yu) 80℃水浴鍋中10min，振蕩3~5次，冷卻後，4000g，常溫離心10min，取上清，加入2mg試劑五，80℃脫色30min，再加入0.5mL提取液，冷卻後，4000g，常溫離心10min，取上清液測定。

測定步驟：

1. 分光光度計或酶標儀(yi) 預熱30min以上，調節波長至480nm，蒸餾水調零。

2. 樣本測定，（在EP管中依次加入下列試劑）：

   混勻，沸水浴煮沸5min左右（蓋緊，防止水分散失）

混勻，沸水浴30min，冷卻後取200μL至微量石英比色皿或96孔板中測定480nm處光吸收值，空白管、標準管和測定管分別記為(wei) A1、A2和A3。空白管和標準管隻要做一管。

蔗糖含量計算：

1、按照蛋白質含量計算

蔗糖含量(mg/mg prot)=(C標準管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行測定蛋白濃度。

2、按照樣品質量計算

蔗糖含量(mg/g鮮重)=(C標準管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)=(A3-A1)÷(A2-A1)÷W。

C標準管：標準管濃度，1mg/mL；V1：加入樣本體(ti) 積，0.025mL；V2：加入提取液體(ti) 積，1mL； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

注意：*低檢測限為(wei) 100ng/g鮮重或1ng/mg prot

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