詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現貨 |
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應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,農林牧漁,製藥/生物製藥 |
土壤錳過氧化物酶(SMnp)測試盒
微量法100T/48S
注意:正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。
測定意義(yi)
錳過氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞(ya) 鐵血紅素的過氧化物酶,主要存在於(yu) 擔子菌中,屬於(yu) 木質素降解酶係,能有效的降解木質素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環芳烴等。
測定原理
錳過氧化物酶在Mn2+存在的條件下,將愈創木酚氧化為(wei) 四鄰甲氧基連酚,在465nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀(yi) 器
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀(yi) 、甲苯。
試劑組成和配製
試劑一:液體(ti) 12mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體(ti) 2mL×1支,4℃保存。
試劑三:液體(ti) 4mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體(ti) 2mL×1支,4℃保存。
樣品處理
新鮮土樣風幹,過30-50目篩。
測定操作
對照管 | 測定管 | |
土樣(mg) | 40 | 40 |
甲苯(μL) | 30 | 30 |
25℃,靜置15min | ||
試劑一(μL) | 140 | 120 |
試劑二(μL) | 20 | |
試劑三(μL) | 40 | 40 |
試劑四(μL) | 20 | 20 |
充分混勻,於(yu) 30℃震蕩反應3h,於(yu) 10000rpm,4℃離心10min,取150μL於(yu) 微量石英比色皿/96孔板,測定465nm處吸光值,記為(wei) A對照管和A測定管,△A=A測定管- A對照管 |
酶活計算公式
用微量石英比色皿測定的計算公式如下
酶活性定義(yi) :每克土壤每天氧化1nmol愈創木酚所需的酶量為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
S-MnP活性(nmol/d /g 土樣)= ×V反總÷W÷T= 66.4×△A÷W
ε:愈創木酚摩爾消光係數:12100L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應總體(ti) 積,0.2mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,3h
用96孔板測定的計算公式如下
酶活性定義(yi) :每克土壤每天氧化1nmol愈創木酚所需的酶量為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。
S-MnP活性(nmol/d /g土樣)= ×V反總÷W÷T= 132.8×△A÷W
ε:愈創木酚摩爾消光係數:12100L/mol/cm;d:比色皿光徑,0.5cm;V反總:反應總體(ti) 積,0.2mL;W:樣本質量,g;T:反應時間,3h
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