土壤硝酸還原酶（SNR）測試盒

土壤硝酸還原酶（SNR）測試盒

微量法 100管/48樣

正式測定前務必取2-3個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定

測定意義(yi)

S-NR催化土壤中硝酸鹽還原為(wei) 亞(ya) 硝酸鹽，是土壤硝態氮還原的關(guan) 鍵酶。研究S-NR的活性對合理施肥，降低氮素的損失具有重要意義(yi) 。

測定原理

S-NR催化硝酸鹽還原為(wei) 亞(ya) 硝酸鹽，NO3ˉ +NADH+H＋→ NO2ˉ +NAD＋ +H 2 O；產(chan) 生的亞(ya) 硝酸鹽能夠在酸性條件下，與(yu) 對–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物；生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰，可用分光光度法測定。

需自備的儀(yi) 器和用品

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、水浴鍋、台式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配製

試劑一：液體(ti) 12mL×1瓶，-20℃保存。

試劑二：液體(ti) 8mL×1瓶，-20℃保存。

試劑三：液體(ti) 9mL×1瓶，4℃保存（如出現結晶析出，60℃-90℃水浴溶解後使用）。

試劑四：液體(ti) 9mL×1瓶，4℃保存。

試劑五：標準品儲(chu) 備液1mL，-20℃保存。

0.1μmol/mL標準液的配製：用時將試劑五稀釋100倍，即取 0.1ml 加蒸餾水定容至 10ml。

樣品處理：

新鮮土樣自然風幹或37度烘箱風幹，過30~50目篩。

測定步驟

1、分光光度計或酶標儀(yi) 預熱30min以上，調節波長至540nm，蒸餾水調零。

2、樣本測定

      混勻後，蓋蓋後37℃水浴24h，8000g 25℃離心10min，取上清液

混勻，25℃顯色20min，4000g，25℃離心10min，取200uL上清液至微量石英比色皿或96孔板中，540nm下讀取各管吸光值。標準管和空白管隻需測一次。每個(ge) 測定管設一個(ge) 對照管。

注意點：

務必先做2個(ge) 樣本的預測定，少部分土壤由於(yu) 樣本特殊性可能出現測定管小於(yu) 對照管，請及時與(yu) 我司技術支持聯係，以獲得針對樣本特殊性的調整測定方法。

S-NR活性計算：

單位的定義(yi) ：每天每g土樣中產(chan) 生1μmol NO2ˉ的量為(wei) 一個(ge)  S-NR活力單位。

S-NR（μmol /d/g土樣）=C標準×（A測定管-A對照管）÷（A標準管-A空白管）×V反總÷W÷T =0.5×（A測定管-A對照管）÷（A標準管-A空白管）

C標準管：標準管濃度，0.1μmol/mL；V反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積，0.3mL；T：反應時間，24h； W：樣本質量，0.06g。

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