土壤中性木聚糖酶測試盒

土壤中性木聚糖酶測試盒

微量法100T/48S

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi) ：

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chan) 生，能催化水解木聚糖，也被稱為(wei) 戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(ye) 中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非澱粉多糖，促進營養(yang) 物質的吸收利用，因而廣泛的應用於(yu) 釀造和飼料工業(ye) 中，NEX一般分離自最適生長pH為(wei) 6-8的微生物。

測定原理：

NEX在中性環境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進一步與(yu) 3,5-二硝基水楊酸發生顯色反應，在540nm處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與(yu) 酶解產(chan) 生的還原糖量成正比，通過測定反應液在540nm吸光值增加速率，可計算NEX活力。

自備實驗用品及儀(yi) 器：

天平、常溫離心機、震蕩儀(yi) 、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板。

試劑組成和配製：

緩衝(chong) 液：液體(ti) 10mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體(ti) 3mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體(ti) 10mL×1瓶，4℃避光保存。

樣品處理

新鮮土樣風幹，過30-50目篩。

測定操作表：

1. 分光光度計/酶標儀(yi) 預熱30min，調節波長至540nm。

2. 操作表

S-NEX計算公式：

1. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線：y = 1.6904x + 0.0058，R2 = 0.9989

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chan) 生1μmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 酶活單位。

S-NEX活力（μmol/d/g土樣）=（△A-0.0058）÷ 1.6904×V反總×103÷ W÷T÷ 150

                        = 28.4×（△A -0.0058）÷ W

V反總：反應總體(ti) 積，0.15mL；T：反應時間，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線：y = 0.8452x + 0.0058，R2 = 0.9989

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chan) 生1μmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 酶活單位。

S-NEX活力（μmol/d/g土樣）=（△A-0.0058）÷ 0.8452×V反總×103÷ W÷T÷ 150

                        = 56.8×（A540-0.0058）÷ W

V反總：反應總體(ti) 積，0.15mL；T：反應時間，1/48d；1000：1mmol/L =103μmol/L；150：木糖分子量。

注意事項：

1. 保證震蕩反應30min，使酶與(yu) 底物充分接觸。

2. 注意90℃水浴防止爆開，以免改變反應體(ti) 係。

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