土壤α葡萄糖苷酶（Sα GC）測試盒

土壤α葡萄糖苷酶（Sα GC）測試盒

微量法 100管/48樣

正式測定前務必取2-3個(ge) 預期差異較大的樣本做預測定

測定意義(yi) ：                           

S-α-GC能夠催化水解芳基或烴基與(yu) 糖基原子團之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶係中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類代謝方麵具有重要生理功能。

測定原理：

S-α-GC能夠催化對-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯酚，後者在400nm有特征光吸收。

自備用品：

可見分光光度計/酶標儀(yi) 、台式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

試劑組成和配製：

試劑一：甲苯5mL×1瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨(lin) 用前加入10mL蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存；

試劑三：液體(ti) 20mL×1瓶，4℃保存； 

試劑四：液體(ti) 15mL×1瓶，4℃保存； 

樣品處理：

新鮮土樣自然風幹或37度烘箱風幹，過30~50目篩。

測定步驟：

1. 分光光度計或酶標儀(yi) 預熱30min以上，調節波長至400nm，蒸餾水調零。

2. 加樣表

混勻， 37℃振蕩反應1h後，90℃水浴5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻，

10000g 25℃離心10min，取上清液（在EP管或96孔板中加入下列試劑）

充分混勻，室溫靜置2min後， 400nm處測定吸光值A，計算ΔA=A測定管-A對照管。每個(ge) 測定管設一個(ge) 對照管。

S-α-GC活力計算：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 0.0032x -0.0027；x為(wei) 標準品濃度（μmol/L），y為(wei) 吸光值。

單位的定義(yi) ：每天每g土樣中產(chan) 生1 μmol對-硝基苯酚定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

S-α-GC活力（μmol/d/g 土樣）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反總÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)

T：反應時間，1h=1/24d； V反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積：3×10-4 L；W：樣本質量，0.02g。

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準條件下測定的回歸方程為(wei) y = 0.0016x -0.0027；x為(wei) 標準品濃度（μmol/L），y為(wei) 吸光值。

單位的定義(yi) ：每天每g土樣中產(chan) 生1 μmol對-硝基苯酚定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 酶活力單位。

S-α-GC活力（μmol/d /g 土樣）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反總÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)

T：反應時間，1h=1/24d； V反總：反應體(ti) 係總體(ti) 積：3×10-4 L；W：樣本質量，0.02g。

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