中性木聚糖酶測試盒

中性木聚糖酶測試盒（比色法）/中性半纖維素酶測試盒（比色法）

測定意義(yi) ：

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chan) 生，能催化水解木聚糖，也被稱為(wei) 戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(ye) 中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質的釋放，以及降低飼料中的非澱粉多糖，促進營養(yang) 物質的吸收利用，因而廣泛的應用於(yu) 釀造和飼料工業(ye) 中，NEX一般分離自最適生長pH為(wei) 6-8的微生物。

測定原理：

NEX在中性環境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進一步與(yu) 3,5-二硝基水楊中發生顯色反應，在540nm處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與(yu) 酶解產(chan) 生的還原糖量成正比，通過測定反應液在540nm吸光值增加速率，可計算NEX活力。

自備實驗用品及儀(yi) 器：

天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋，可見分光光度計/酶標儀(yi) 、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑組成和配製：

緩衝(chong) 液：液體(ti) 65mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體(ti) 10mL×1瓶，4℃避光保存。（若出現白色絮狀或顆粒狀沉澱，可60℃加熱溶解後使用）。

試劑二：液體(ti) 10mL×1瓶，4℃避光保存。

粗酶提取：

1. 發酵液：發酵液於(yu) 8000g，4℃，離心15min，取上清，作為(wei) 待測樣品。

2. 酶幹粉：稱約0.1mg，加1mL緩衝(chong) 液溶解待測。

3. 組織樣本：按照組織質量（g）：提取液體(ti) 積(mL)為(wei) 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL緩衝(chong) 液）進行冰浴勻漿，然後8000g，4℃，離心10min，取上清待測。

測定操作表：

1. 分光光度計/酶標儀(yi) 預熱30min，調節波長至540nm。

2. 操作表

NEX計算公式：

1. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線：y = 1.6904x + 0.0058，R2 = 0.9989

1. 按液體(ti) 體(ti) 積活力計算：

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每毫升液體(ti) 樣本每分鍾分解木聚糖產(chan) 生1nmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 中性木聚糖酶的活力單位。

NEX活力（nmol/min/mL）= （ΔA-0.0058）÷1.6904÷150÷T×稀釋倍數×106

= 657× (ΔA-0.0058)

2. 按蛋白濃度計算：

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每毫克蛋白每分鍾分解木聚糖產(chan) 生1nmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 中性木聚糖酶的活力單位。

NEX活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA -0.0058）÷1.6904÷150÷T×稀釋倍數×106÷Cpr

= 657×(ΔA -0.0058 ) ÷Cpr

3. 按鮮重計算：

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每克樣本每分鍾分解木聚糖產(chan) 生1nmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 中性木聚糖酶的活力單位。

NEX活力（nmol/min/g鮮重）= （ΔA -0.0058）÷1.6904÷150÷T×稀釋倍數×106÷W

= 657×(ΔA -0.0058 ) ÷W

150：木糖的分子量；T：反應時間，30min；稀釋倍數=V反總÷V樣=300µL÷60µL=5；

106：轉化因子，即1mg/mL=106ng/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線：y = 0.8452x + 0.0058，R2 = 0.9989

1. 按液體(ti) 體(ti) 積活力計算：

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每毫升液體(ti) 樣本每分鍾分解木聚糖產(chan) 生1nmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 中性木聚糖酶的活力單位。

NEX活力（nmol/min/mL）= （ΔA-0.0058）÷0.8452÷150÷T×稀釋倍數×106

= 1315× (ΔA-0.0058)

2. 按蛋白濃度計算：

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每毫克蛋白每分鍾分解木聚糖產(chan) 生1nmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 中性木聚糖酶的活力單位。

NEX活力（nmol/min/mg prot）= （ΔA -0.0058）÷0.8452÷150÷T×稀釋倍數×106÷Cpr

= 1315×(ΔA -0.0058 ) ÷Cpr

3. 按鮮重計算：

酶活定義(yi) ：50℃，pH6.0條件下，每克樣本每分鍾分解木聚糖產(chan) 生1nmol 還原糖所需的酶量為(wei) 一個(ge) 中性木聚糖酶的活力單位。

NEX活力（nmol/min/g鮮重）= （ΔA -0.0058）÷0.8452÷150÷T×稀釋倍數×106÷W

= 1315×(ΔA -0.0058 ) ÷W

150：木糖的分子量；T：反應時間，30min；稀釋倍數=V反總÷V樣=300µL÷60µL=5；

106：轉化因子，即1mg/mL=106ng/mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。

注意事項：

1. 吸光度變化應該控製在0.01~0.8之間，否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計算公式中參與(yu) 計算的稀釋倍數要相應改變；也可以延長或者縮短反應時間。

2. 試劑盒2-8℃保存，保質期3個(ge) 月，建議盡快使用。

paybet雷竞技

1. 國內(nei) 試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾(zhong) 多有名生命科學領域的研究試劑、儀(yi) 器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED Biosesystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosesolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產(chan) 品都提供售後服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為(wei) 客戶全麵解決(jue) 實驗、生產(chan) 、開發需求。公司整合國際與(yu) 國內(nei) 資源，加強網絡建設，提高公司內(nei) 部運作效率，為(wei) 客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為(wei) 客戶提供優(you) 惠的價(jia) 格。

中性木聚糖酶測試盒（比色法）/中性半纖維素酶測試盒（比色法）