H2S含量測定試劑盒

H2S含量測定試劑盒

注意：正式測定之前選擇2-3個(ge) 預期差異大的樣本做預測定。

測定意義(yi) ：

H2S是一種新型氣態信號分子，存在於(yu) 腦內(nei) 的神經遞質，生理濃度的H2S對神經係統海馬的長時程增強功能具有重要的調節作用，並對自發性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發揮著重要的病理生理效應。

測定原理：

H2S與(yu) 醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應生成亞(ya) 甲基藍，亞(ya) 甲基藍在665nm處有最大吸收峰，通過測定其吸光值可計算H2S含量。

自備實驗用品及儀(yi) 器：

天平、低溫離心機、酶標儀(yi) 、96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配製：

提取液：液體(ti) 100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體(ti) 25mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體(ti) 16mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體(ti) 8mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑四：液體(ti) 8mL×1瓶，4℃保存。

試劑五：液體(ti) 1.5mL×1管，4℃避光保存。

樣品處理：

1. 組織：按照組織質量（g）：提取液體(ti) 積(mL)為(wei) 1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然後10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104個(ge) ）：提取液體(ti) 積（mL）為(wei) 500~1000：1的比例（建議500萬(wan) 細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然後10000g，4℃，離心10min，取上清置於(yu) 冰上待測。

3. 血清（漿）：直接測定。

操作表：

1. 酶標儀(yi) 預熱30min，調節波長至665nm。

2. 操作表

H2S含量計算公式：

用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線回歸方程為(wei) ：y = 0.0022x，R2 = 0.9988

（1）組織樣品

a.按照蛋白濃度計算

H2S（nmol/mg prot）=×V反總÷(V樣×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr

b.按照樣本重量計算

H2S（nmol/g 鮮重）=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 681.8×ΔA÷W

(3) 細胞

H2S（nmol/104 cell）=×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數量(萬(wan) 個(ge) )）=681.8×ΔA÷細胞數量（萬(wan) 個(ge) ）

（2）液體(ti) 樣品H2S（nmol/mL）=×V反總÷V樣= 681.8×ΔA

V反總：反應總體(ti) 積，0.225mL；V樣：反應中樣品體(ti) 積，0.15mL；V樣總：加入提取液體(ti) 積，1mL；W：樣品質量，g；Cpr：蛋白濃度，mg/mL

注意事項

*低檢出限為(wei) 1nmol/mL。

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• 中文名稱：甲泛葡胺

• 英文名稱：Metrizamide

分子式：C18H22I3N3O8

分子量：789.1

• CAS號：31112-62-6

  級別：Reagent Grade

• EINECS編號：250-475-5

• 儲(chu) 存條件：2～8℃

• 中文別名：甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影

• 英文別名：2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco

• 是否危險：否

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甲泛葡胺/甲泛影酰胺/室椎影/阿米派克/造影胺/Metrizamide