jembio DNA 聚合酶—— KlenTaq1

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KlenTaq1是一種熱穩定性 DNA 聚合酶，由編碼棲熱菌 DNA 聚合酶的基因的 5' 缺失表達，從而具有高度活性且熱穩定性更高的 DNA 聚合酶活性。在反應緩衝液 PC2 中重複暴露於 980°C 似乎不會降低酶活性。即使暴露於 990°C 後仍保留顯著的活性。全長酶不能耐受這些處理。                KlenTaq1    ™ 酶缺少野生型全長 Taq DNA 聚合酶的 N 末端部分。該蛋白的這一部分與大腸杆菌 DNA 聚合酶 1 的 5' 核酸外切酶區域同源。  因此， KlenTaq1 ™ 與 Hoffman LaRoche 的 Stoffel 片段相似但又不同。                對於不含甘油的KlenTaq1 （目錄號 1001 NGKT）：將酶和緩衝液儲存在 4°C 下。儲存緩衝液為 50 mM 硫酸銨、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10mM 巰基乙醇、無明膠和 0.5% Thesit。                對於50% 甘油中的KlenTaq1 （目錄號 1001）：將酶儲存在 -200°C 下，將緩衝液儲存在 40°C 下。儲存緩衝液中的甘油可防止在 -20°C 下凍結，但 Thesit 在此溫度下會導致一些稠化。可以選擇，但建議在分配前在冰上加熱至 0°C。對於長期儲存，可以使用 -70°C 或 -80°C，但我們建議酶不要冷凍多次。重新冷凍和解凍會導致酶活性降低。儲存緩衝液為 50% 甘油（v/v；63% w/v）、50 mM 硫酸銨、20 mM Tris-HCl pH 8.55、0.1 mM EDTA、10 mM 巰基乙醇、無明膠和 0.5% Thesit。                 濃度：5   KlenTaq1™單位（72°C 下 30 分鍾內摻入 60 nmole）。以活化的鮭魚精子DNA為模板； PC2（見下文）是緩衝區。請注意，這些單位比標準單位大 6 倍。以標準單位（10 nmole/30 分鍾）計算，此處的酶濃度約為 30 單位/ml。                    盡管該酶在多種條件下都能良好發揮作用，但推薦的反應緩衝液 PC2 為：50 mM Tris-HCl pH 9.1、16 mM 硫酸銨、3.5 mM MgCl2 和 150 mg/ml BSA（隨訂單提供） 。請注意，與其他熱穩定性 DNA 聚合酶緩衝液相比，不含 KC1 和明膠。 dNTP 濃度可以從每個 50 µM 到每個 1.2 mM 不等，但通常使用 200 µM。如果 DNA 摻入超過 500 bp，您將需要比 Taq 蛋白更多的KlenTaq1™蛋白。 KlenTaq1™ 的運輸濃度為 25-30 u/μl，因此如果使用與全長 Taq DNA 聚合酶相同的數量（羅氏推薦），它可以輕鬆摻入 2000 bp。

jembio專(zhuan) 注於(yu) DNA修飾酶，特別是TAQ DNA聚合酶。KlenTaq1和KlenTaq-S是我們(men) 的主要銷售產(chan) 品。

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