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詳細介紹
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | C5866 |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 一個月 |
epochlifescience：CloneRanger 拓撲異構酶試劑盒
CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning Kit專(zhuan) 為(wei) 同等效率地克隆兩(liang) 個(ge) 平端片段而設計
零背景全拓撲異構酶克隆試劑盒利用痘苗病毒拓撲異構酶 I 的 DNA 鏈轉移活性，快速克隆長達 10 kb 的 DNA 片段。痘苗病毒 DNA 拓撲異構酶 I 與(yu) 含有 5' CCCTT↓ 切割識別基序的質粒載體(ti) 形成 3'-磷酰基中間體(ti) 。然後，共價(jia) 結合的拓撲異構酶 I 將切割的載體(ti) DNA 鏈轉移到帶有遊離 5'-OH 末端的待克隆 DNA 片段（參見下圖）。該轉移反應快速且可重複。該試劑盒中包含的克隆載體(ti) pCloneEZ-Omni-Amp/HC 和 pCloneEZ-Omni-Kan/HC 是經過改造的高拷貝數質粒，可耐受輕度毒性基因。可快速克隆劇毒基因。
不包括感受態細胞。
零背景：> 90% 的隨機挑選的克隆包含正確的插入片段。
快速：PCR片段與(yu) 載體(ti) 混合後立即轉化，無需孵育。
CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning 試劑盒流程圖：
套件尺寸 | ||
| 成分 | C5865-25/C5866-25（25 次反應） | C5865-50/C5866-50（50 次反應） |
| pCloneEZ-Omni-Amp/HC 或 pCloneEZ-Omni-Kan/HC (20 ng/μl) | 25微升 | 50 微升 |
| 10X 增強劑 | 30 微升 | 60 微升 |
| 對照插入物 lacZα (20ng/μl) | 10微升 | 10微升 |
| 空白對照載體 (100ng/μl) | 20 微升 | 20 微升 |
| M13F 測序引物 (10pmol) | 100 微升 | 100 微升 |
| M13R 測序引物 (10pmol) | 100 微升 | 100 微升 |
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