Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)

Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，產(chan) 品型號：IGY-1910。

Chicken IgY Purification Kit (10 Egg yolks)，

儲(chu) 藏條件 

所有試劑在 4oC 下可穩定保存長達 1 年。 

 一般建議

1. 雞蛋可在 4°C 下長期保存，但建議在使用本試劑盒分離 IgY 之前將雞蛋打碎。分離後的蛋黃可在 4°C 的 0.05% 中儲(chu) 存數天，而 IgY 回收率不會(hui) 有任何明顯損失。不應將蛋黃冷凍儲(chu) 存以用於(yu) 此試劑盒。

2. 蛋黃中的脂質含量差異很大，有時破損步驟不會(hui) 產(chan) 生清澈的上清液。在這種情況下，可以添加更多體(ti) 積的試劑 A 以破壞蛋黃。

IgY 純化試劑盒 - 如何從(cong) 蛋黃中純化 IgY 抗體(ti)

IGY 的分離和純化步驟很簡單，在室溫下進行。

1. 使用蛋黃分離器將新鮮雞蛋打碎並分離蛋黃。蛋黃被刺破釋放出蛋黃內(nei) 容物，可以使用牙簽輕鬆去除膜。

2. 對於(yu) 新鮮蛋黃，在持續攪拌下加入 5 倍體(ti) 積的試劑 A 的蛋黃重量。注意：如果蛋黃放置 3 天或以上且未冷凍，建議使用 6 倍體(ti) 積的試劑 A。不建議使用此試劑盒使用冷凍蛋黃。

3. 加入所有試劑後，會(hui) 形成濃稠的黃色沉澱。繼續攪拌 10 分鍾，並將內(nei) 容物在 4 ° C 下孵育過夜。沉澱物將沉澱下來，1-2 小時內(nei) 可以看到澄清的上清液。

4. 將內(nei) 容物在冷搖擺式離心機中於(yu) 4 ° C以 3500-4000Xg 離心 30 分鍾。

5. 將澄清的上清液倒入預冷的燒杯中，並在不斷攪拌下緩慢加入等體(ti) 積的試劑 B。繼續攪拌 10 分鍾，並將混合物在 4 ° C 下放置 2-4 小時至過夜。1-2 小時內(nei) ，底部會(hui) 出現透明的白色沉澱物。

6. 將內(nei) 容物在 4°C 下以 4000xg 離心 20 分鍾以收集白色沉澱物。

7.  小心去除所有液體(ti) ，並使用以下公式在抗體(ti) 重組緩衝(chong) 液中重組白色顆粒。對於(yu) 10 克蛋黃，添加 2 至 2.5 毫升的抗體(ti) 重組緩衝(chong) 液。

8. 通過在 280 處測量 1:20 稀釋的 OD，按內(nei) 容量化 IgY。 

9. 總 IgY 可按 1:1 的比例保存在抗體(ti) 穩定緩衝(chong) 液中，可在 -40°C 或以下長期保存。 

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