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細胞培養基簡述

更新時間:2024-08-29      點擊次數:692

培養(yang) 的細胞需要細致的環境控製才能成功生長和維持。全麵的方法包括確保無菌、營養(yang) 供應、pH穩定性和溫度控製。

無菌條件和營養供應

為(wei) 了防止汙染並確保細胞存活,無菌環境至關(guan) 重要。這通常是通過無菌技術和專(zhuan) 門設備如層流罩來實現的。營養(yang) 是通過培養(yang) 基提供的,培養(yang) 基中含有多種必需成分,包括:

  • 無機鹽:

    對維持滲透平衡和提供細胞活動所需的離子至關重要。
  • 碳水化合物:

    作為能源;葡萄糖是*常用的糖。
  • 氨基酸:

    蛋白質的組成部分;有些是必需的,不能由細胞合成。
  • 維生素:

    作為酶促反應的輔助因子;b族維生素對細胞新陳代謝至關重要。
  • 脂肪酸和脂類:

    細胞膜完整性和功能的基本成分。
  • 蛋白質和肽:

    在無血清培養基中,這些取代了通常由血清提供的生長因子和結合蛋白。
  • 血清:

    雖然無血清替代品越來越受歡迎,以減少可變性和汙染風險,但通常作為生長因子的來源。
  • pH和溫度穩定性:

    細胞通常需要7.2-7.4的pH範圍以實現最佳生長。這是由緩衝係統調節的,緩衝係統可以是基於CO2/碳酸氫鹽的,也可以是使用諸如HEPES之類的試劑通過化學方法實現的。溫度保持在37°C左右,以模擬生理條件。

媒體變體和優化

多年來,已經開發了各種基礎培養(yang) 基來滿足特定細胞類型的需要:

  • 平衡鹽溶液:

    形成更複雜的介質配方的基礎。
  • 基礎培養(yang) 基,

    *低必需培養基(MEM),用於原代培養和二倍體細胞。
  • 複雜介質:

    像RPMI 1640一樣,它們適用於更廣泛的哺乳動物細胞。
  • 無血清培養(yang) 基:

    為特定應用量身定製,降低動物源性成分的汙染風險。

媒體準備和質量控製

培養(yang) 基可以由基本成分在內(nei) 部製備,也可以購買(mai) 現成的溶液。質量控製包括確保沒有汙染物和成分的適當濃度。粉末培養(yang) 基的複原需要高等級的水,並且製備的培養(yang) 基必須滅菌,通常通過過濾。

血清使用和安全注意事項

血清,尤其是胎牛血清(FBS)的使用是常見的,因為(wei) 其含有豐(feng) 富的生長因子。然而,由於(yu) 對瘋牛病等疾病的關(guan) 注,嚴(yan) 格的測試和采購協議是為(wei) 了確保安全。

法規指導動物源材料的培養(yang) ,強調采購和測試的重要性。在可能的情況下消除這些材料的趨勢反映在開發無血清和無動物的培養(yang) 基替代品中。

總之,細胞培養(yang) 基在體(ti) 外細胞的生長和維持中起著重要作用。每種成分都經過精心選擇和優(you) 化,以模擬體(ti) 內(nei) 環境,確保細胞具有生長、存活和功能性條件。


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