dsGreen 是一種非常靈敏的染料，用於檢測雙鏈 DNA (dsDNA)。兩種染料均用於實時 qPCR 實驗中擴增的非特異性檢測。

1. 如果 dsGreen 試劑儲(chu) 存溫度低於(yu) 20 °С，請將其解凍並保存在室溫下。為(wei) 了快速解凍，可將試劑加熱至 50 °С。

2. 根據 PCR 試劑製造商的說明計算反應所需試劑的體(ti) 積。請注意，dsGreen（庫存 100х）必須在 PCR 主混合物中稀釋至最高 1 倍濃度。

3. 根據 PCR 試劑製造商的說明製備不含 DNA 的 1x 主混合物，添加必要量的 dsGreen。如果您使用不帶熱啟動的 Taq 聚合酶，請將預混液和 PCR 管放在冰上。

4. 將主混合物轉移至管或板中並添加 DNA。

5. 根據您的儀(yi) 器製造商的說明繼續進行放大。

筆記：

qPCR 實驗中始終包含陽性和陰性對照。 qPCR 擴增的溫度程序與(yu) 給定模板和引物的標準 PCR 程序沒有區別。對於(yu) 檢測，應使用 FAM 通道。為(wei) 了能夠區分特定產(chan) 物和引物二聚體(ti) ，請在 PCR 程序中使用熔解曲線步驟。