對於(yu) 大多數實驗室來說,正確的決(jue) 定取決(jue) 於(yu) 科學和成本的某種結合。需要考慮的一些問題是:
您需要多少材料以及需要多長時間?
早期探索型項目可能隻需要有限數量的材料,或者您的工作流程可能一次僅(jin) 使用幾微克的抗體(ti) 。利用多克隆生成對於(yu) 這些情況非常有效。兔子是多克隆抗體(ti) 的行業(ye) 標準,因為(wei) 它具有強大的免疫係統,並且可以根據需要靈活地一次生產(chan) 多年的抗體(ti) 。如果您需要預先大量的材料而不是長期使用,那麽(me) 對較大的動物(例如山羊)進行免疫可能會(hui) 有所幫助。
然而,如果您正在嚐試生產(chan) 用於(yu) 有可能無限期使用的檢測的試劑,那麽(me) 單克隆生產(chan) 可能更理想。
抗體(ti) 的活性是否必須始終相同,或者某些批次間的差異在您的係統中是否可行?
通過多克隆生產(chan) ,動物得到免疫,您的測試物品就成為(wei) 最終收集到的一切。隨著時間的推移,反應可能會(hui) 發生變化或成熟,但可以通過在檢測中使用一致量的抗體(ti) 來減輕這種情況。
同時,單克隆生產(chan) 的明確目的是執行多個(ge) 篩選步驟,以找到表達適合您的檢測反應的抗體(ti) 的單個(ge) 細胞係。隻要能夠保持穩定性,該細胞係就應該能夠在您需要時表達抗體(ti) 。最終一致性的最終保證是對抗體(ti) 的可變區進行測序並將其生產(chan) 為(wei) 重組蛋白。
該項目有時間限製嗎?
多克隆項目平均需要三個(ge) 月的時間,而分離出具有所需性能的特定單克隆細胞係可能需要六個(ge) 月的時間。此後生產(chan) 重組蛋白形式的抗體(ti) 可能還需要三個(ge) 月或更長時間。
您是否已經擁有希望與(yu) 新生成的材料並行使用的現有抗體(ti) ?
無論您當前擁有的抗體(ti) 是多克隆還是單克隆,請選擇不同的物種來開發第二抗體(ti) 。這樣您就可以用單獨的二抗進行探測並同時查看兩(liang) 種反應性。例如,在雞、山羊或豚鼠中製備多克隆是最常選擇與(yu) 現有兔抗體(ti) 並行使用的選項。
您的預算是多少?
由於(yu) 固有的成本效益(平均單克隆成本約為(wei) 平均多克隆成本的六倍),同時多種抗體(ti) 的高通量需求很可能會(hui) 利用多克隆生產(chan) 。然而,對於(yu) 早期診斷或治療,以單克隆項目開始可能會(hui) 更好地滿足您的整體(ti) 需求,並在項目加速方麵帶來紅利。