肽的重構、溶解度和儲存
更新時間：2023-12-22 點擊次數：1036
為了確保我們的材料保持其完整性，建議遵循以下存儲和使用指南。一般來說，我們不必將肽溶解在水性緩衝液中以進行質量控製。我們的建議基於經驗和肽序列。
最規則和帶電的肽
要確定溶解肽的合適方法，請僅使用少量合適的溶劑。將肽溶解在蒸餾水或去離子無菌水中（如果可能，無氧）。隻有當肽溶解後，才應添加所需的緩衝鹽/溶液，並將溶液稀釋至最終濃度，即先溶解肽，然後添加緩衝液。
肽溶液中可能發生細菌降解。
始終使用無菌水溶解肽。
如果需要，可以通過 0.45 um 或 0.2 um 過濾器過濾肽溶液。不要將肽溶液保存在室溫下。
半胱氨酸、蛋氨酸或色氨酸等氨基酸容易氧化，應溶解並儲存在無氧水中。這可以通過在減壓下通過保留惰性氣體如氮氣、氦氣或氬氣進行脫氣來製備。
如果肽不溶於純水，超聲處理可能有助於分解任何顆粒並提高溶解速度。
注意：超聲處理會導致溶液升溫和肽降解。
對於高堿性肽
如果肽含有許多堿性氨基酸（K、R 等），請使用乙酸水溶液（1 至 10%），並進行或不進行超聲處理。對於疏水性很強的肽，請使用 50% 乙酸水溶液。
對於高酸性肽
如果肽含有許多酸性氨基酸（E、D 等），請使用氨水溶液（1 至 10%）或揮發性堿性緩衝液（pH 高達 8），例如 N-乙基嗎啉乙酸鹽或碳酸氫鹽，並進行或不進行超聲處理。色譜分析前可能需要調整 pH 值。
丙醇或乙腈可用於溶解一些中等大小的肽。如果要將肽注射到柱上，有機溶劑尤其是丙醇的用量必須保持少量，否則保留時間將受到很大影響。
對於高疏水性肽
如果肽具有高度疏水性，具有芳香族或烴類側鏈，例如 Val、Leu、Ile、Met、Phe、Try、Ala，或者如果肽是中性，則使用離液劑，例如 DMF/D">
a。高濃度離液鹽可通過破壞二級結構來幫助溶解肽。
b.離液劑適合製備用於分析的溶液，但可能會幹擾用於肽研究的生物係統
C。滴加 DMF 或 DMSO（最多 30%）直至肽溶解。
d.在反相色譜中，DMF 將與緩衝液前沿一起洗脫。峰值可能會很高，具體取決於注射量。大多數肽的保留時間比大的 DMF 峰洗脫所需的幾分鍾要長。如果肽非常小並且洗脫較早，則注射肽時可能必須降低起始百分比。
凍幹肽的儲存
所有肽均應冷藏保存，最好在 -20 ℃ 下保存，以獲得最大穩定性。大多數肽在 -20 ℃ 以下儲存時將保持穩定數月。這適用於許多氨基酸衍生物、脂質、酶和其他蛋白質以及肽。例外是固定化蛋白質和肽。
使用冷藏產品時，應將瓶子或小瓶加熱至室溫。打開前放入裝有新鮮幹燥劑的幹燥器中。從 -20 ℃ 起，這可能需要一個小時或更長時間，具體取決於包裝尺寸。如果不這樣做，打開瓶子或小瓶時可能會導致產品上形成冷凝，並會大大降低材料的穩定性。打開後，應稱出所需數量以防止吸水。對於某些吸濕性肽來說，這是一個特殊的問題。
溶液中肽的儲存
溶液中的肽比凍幹肽穩定性差得多。為了獲得最佳結果，請遵循以下準則。
1. 避免反複解凍和冷凍。建議將儲備溶液等分。隻解凍需要的部分。請勿儲存稀釋溶液。
2. 為了獲得最大的穩定性，請在 -20 ℃ 下儲存在無菌、pH 5 至 7 的緩衝溶液中。
3. 半胱氨酸、蛋氨酸或色氨酸等氨基酸容易氧化，應溶解或保存在無氧水中。
4. 細菌汙染會(hui) 降解肽，因此請使用無菌水或緩衝(chong) 液。
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