磁珠的使用技巧

純化是大多數分子生物學實驗中的常見程序，例如去除 PCR 反應中的短引物、未摻入的 dNTP、酶和鹽以及其他雜質。純化方法有多種，包括過濾、離心和分離。分離已成為(wei) 生命科學中非常流行的方法，並使用各種類型的固相支持物。這包括瓊脂糖珠、瓊脂糖珠、二氧化矽珠和磁珠。使用磁珠分離是所有磁珠分離方法中最快、最幹淨且有效的技術。

磁珠可以塗有針對抗原、抗體(ti) 、蛋白質或核酸的特異性親(qin) 和配體(ti) 。將磁珠與(yu) 樣品一起孵育後，對磁珠（和附著的生物分子）施加磁力，以將磁珠收集成濃縮顆粒。分離完成後，可以輕鬆去除上清液，並且可以從(cong) 磁珠上洗脫與(yu) 珠子結合的生物分子。

使用磁力操縱磁珠的能力使得洗滌步驟比使用瓊脂糖、瓊脂糖凝膠或矽珠更容易和更快。純化的產(chan) 物還可以使用磁力分離方法以更濃縮的形式回收。

以下是給新用戶的一些提示：

1.       重懸珠子

磁珠需要有足夠的磁性含量，以便可以通過磁鐵簡單地下拉。傳(chuan) 統磁珠的尺寸超過 1 µm (1 µm = 1000nm)。較新的珠子尺寸更小（低至數百納米），以增加珠子表麵積。這導致結合能力增加並改善分散性。磁珠是由氧化鐵組成的重顆粒，因此它們(men) 會(hui) 隨著時間的推移而沉澱。珠子的尺寸越大，沉澱得越快。使用前渦旋並重懸磁珠非常重要，以重新分散磁珠並確保等分試樣之間的一致性。

2.       清洗珠子

增加洗滌步驟的數量有助於(yu) 減少與(yu) 磁珠的非特異性結合。用乙醇（用於(yu) 核酸純化）或洗滌緩衝(chong) 液洗滌磁珠時，請使用足夠的洗滌溶液覆蓋沉澱。

3.       了解珠子的特性

磁珠有不同的尺寸、形狀、磁響應、塗層、緩衝(chong) 條件和附著的官能團。這些變量影響珠子的特性。獲取珠子的基本信息對於(yu) 更好地了解如何處理它們(men) 非常重要。

4.       捕獲珠子

一般來說，磁珠會(hui) 被磁鐵吸引並在一分鍾內(nei) 形成顆粒。延長磁珠對磁鐵的吸引力，以確保所有磁珠均被回收。

5.       去除洗滌液時不要擾動珠粒

去除洗滌液或上清液時，傾(qing) 斜移液器吸頭，使吸頭不接觸磁珠沉澱。這可以防止珠子與(yu) 上清液重新混合。使用具有傾(qing) 斜側(ce) 麵的磁力架，使珠粒集中在管壁的一側(ce) 。這使得去除上清液變得更加容易。