Duolink® PLA的實驗對照

Duolink® PLA 結果為(wei) 蛋白質事件（表達、相互作用或修飾）提供了相對定量。因此，加入技術對照組，以及在可能的情況下加入生物對照組，是十分重要的。

技術對照：

每個(ge) Duolink® PLA 實驗中應該包含兩(liang) 個(ge) 技術對照組。這包括：

1.分別省略一種一抗

用於(yu) 檢測每種一抗的非特異性結合

有助於(yu) 確定最佳一抗效價(jia)

2.省略所有一抗

用於(yu) 檢測係統中 Duolink® PLA 探針的非特異性結合

生物對照：

除了技術對照外，強烈建議使用生物對照。陽性和陰性生物對照均可提供有價(jia) 值的信息。

1.陽性對照：

用含已知蛋白表達、相互作用或修飾的單獨樣本來測試試劑

可誘導係統（如生長因子刺激、熱休克等）的使用將提供Duolink® PLA信號的生物學相關(guan) 性

2.陰性對照：

使用不表達蛋白質靶標的樣品（例如敲除、沉默等）將提供一抗特異性的信息

使用不相關(guan) 抗體(ti) （例如同種型 IgG、非相互作用蛋白的抗體(ti) 等）將提供關(guan) 於(yu) Duolink® PLA 探針特異性的信息

使用阻止蛋白質相互作用或修飾的抑製劑將提供 Duolink® PLA 信號的生物學相關(guan) 性  

優(you) 化 Duolink® 鄰位連接實驗的補充！

封閉液和抗體(ti) 稀釋劑：

Duolink®封閉液和抗體(ti) 稀釋劑含有 Duolink® PLA 探針（PLUS和MINUS）。這些溶液已進行優(you) 化，可與(yu) Duolink® PLA試劑配合使用，以最大限度地減少抗體(ti) 和檢測寡核苷酸的非特異性結合。然而，在這些條件下，必須驗證您的一抗與(yu) 目標蛋白靶標的特異性結合。應通過 Duolink® PLA 單一識別實驗，或者 IF 或 IHC 來分別檢測每種一抗。

如果您之前已經確定了用於(yu) IF 或 IHC 染色的封閉液和/或抗體(ti) 稀釋劑，則這些溶液很可能也可用於(yu) Duolink® PLA。在這些溶液中不應該使用來自與(yu) 您的一抗相同物種的同種型 IgG 作為(wei) 封閉液，因為(wei) 這將導致來自 Duolink® PLA 探針的錯誤信號。