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同種型對照抗體選擇和使用

更新時間:2023-07-31      點擊次數:622

什麽是同種型對照抗體?

選擇和使用正確的同種型對照抗體(ti) 是所有體(ti) 內(nei) 實驗的重要組成部分。這些抗體(ti) 用作陰性對照——它們(men) 與(yu) 主要靶向抗體(ti) 的確切宿主物種、同種型和亞(ya) 類相匹配,但對目標生物體(ti) 或物種中存在的蛋白質沒有特異性。同型對照抗體(ti) 被設計為(wei) 在體(ti) 內(nei) 動物模型中不結合,但保留實驗中使用的一抗的所有非特異性特征。

為什麽在體內實驗中納入同型對照治療組很重要

需要納入同種型對照治療組才能生成可靠的數據,因為(wei) 它使研究人員能夠準確地區分從(cong) 一抗以抗原特異性方式結合觀察到的結果和從(cong) 非抗原特異性結合或抗體(ti) 注射的其他非特異性效應觀察到的結果。

給予動物的一抗可以與(yu) 細胞上的 Fc 受體(ti) 發生非抗原特異性相互作用,包括 B 細胞、樹突狀細胞、NK 細胞、巨噬細胞等。有時 Fc 受體(ti) 結合參與(yu) 一抗的作用機製,例如抗體(ti) 定向細胞毒性 (ADCC)。然而,非抗原特異性 Fc 受體(ti) 結合可能導致可觀察到的與(yu) 抗原特異性結合無關(guan) 的生物效應或表型。與(yu) 一抗同種型和亞(ya) 類相匹配的同種型對照抗體(ti) 也將與(yu) Fc 受體(ti) 結合,從(cong) 而使研究人員能夠控製這些效應。

除了匹配同種型和亞(ya) 類外,理想的同種型對照還必須與(yu) 一抗的宿主物種匹配。許多用於(yu) 小鼠模型體(ti) 內(nei) 研究的一抗單克隆抗體(ti) 是利用雜交瘤技術在大鼠或倉(cang) 鼠身上產(chan) 生的。當異種大鼠或倉(cang) 鼠 IgG 注射到小鼠體(ti) 內(nei) 時,可能會(hui) 針對注射的抗體(ti) 產(chan) 生免疫反應。多次注射增加了這種可能性。與(yu) Fc 受體(ti) 結合一樣,這也可能導致與(yu) 抗原特異性結合無關(guan) 的可觀察表型。包括一組用與(yu) 一抗宿主物種相匹配的同種型對照抗體(ti) 治療的小鼠,使研究人員能夠控製這些非抗原特異性效應。

有關同型對照的常見問題

  1. 可以使用未治療組或 PBS 治療組代替同型對照治療組嗎?

  2. 不建議使用未經處理的組或 PBS 處理的組作為(wei) 簡化的陰性對照。必須使用同種型對照抗體(ti) 來準確區分由於(yu) 一抗以抗原特異性方式結合而觀察到的結果和由於(yu) 非抗原特異性結合或其他非特異性相互作用而觀察到的結果。

  3. 如果用不同宿主物種、同種型或亞(ya) 類的多種一抗治療小鼠,對照組中的小鼠是否需要用多種同種型對照抗體(ti) 治療,還是單一同種型對照抗體(ti) 就足夠了?

由於(yu) 抗體(ti) 的宿主物種、同種型和亞(ya) 類決(jue) 定了其潛在的非特異性效應,因此同種型對照組必須與(yu) 一抗處理組進行相同的處理。例如,如果第一組注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體(ti) ,則同種型對照組也必須注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體(ti) 。

為什麽選擇 Bio X Cell 同型對照抗體?

Bio X Cell 提供廣泛的同種型對照抗體(ti) ,適用於(yu) 體(ti) 內(nei) 體(ti) 外應用。我們(men) 的同型對照具有:

  • 純度我們(men) 優(you) 化的專(zhuan) 有抗體(ti) 製造方法可確保獲得超純抗體(ti) 解決(jue) 方案,無需添加蛋白質或化學物質。使用 SDS-PAGE 對每批產(chan) 品的純度進行 QC 測試。

  • 超低內(nei) 毒素水平每個(ge) 批次的內(nei) 毒素水平均經過 QC 測試。我們(men) 的InVivo MAb 產(chan) 品≤ 2EU/mg,InVivo Plus 產(chan) 品≤ 1EU/mg。如果需要內(nei) 毒素水平低於(yu) 1EU/mg,請聯係我們(men) 的技術支持了解詳細信息。

  • 無病原體(ti) 每批InVivo Plus 產(chan) 品均經過全麵的鼠類病原體(ti) 篩查。結果詳細記錄在特定產(chan) 品的數據表中,以幫助您遵守 IACUC 和動物設施的要求。

  • 低蛋白質聚集我們(men) 專(zhuan) 有的抗體(ti) 製造方法可確保抗體(ti) 解決(jue) 方案的蛋白質聚集水平非常低。此外,每批InVivo Plus 產(chan) 品均經過聚合水平 QC 測試,並保證低於(yu) 總蛋白的 5%。

如何選擇合適的同型對照抗體?

同種型對照抗體(ti) 必須與(yu) 一抗的宿主物種、同種型和亞(ya) 類相匹配。為(wei) 了方便客戶,我們(men) 在每個(ge) 產(chan) 品頁麵上都包含了這些重要的產(chan) 品信息以及所有一抗的推薦同型對照。下表是適用於(yu) 體(ti) 內(nei) 體(ti) 外研究的 Bio X Cell 同型對照抗體(ti) 的完整列表。

Armenian Hamster IgG Isotype Control, Anti-Glutathione S-TransferasePIPArmenian HamsterIgGBE0260N/A
Polyclonal Armenian Hamster IgGN/AArmenian HamsterIgGBE0091BP0091*
Polyclonal Goat IgGN/AGoatIgGBE0130N/A
Hamster IgG F(Ab')2 FragmentsHamster IgG F(Ab')2 FragmentsHamsterPolyclonalBE0091-FABN/A
Human IgG2 Isotype ControlN/AHumanIgG2, ΛBE0301BP0301*
Human IgG1 Isotype ControlN/AHumanIgG1, ΚBE0297BP0297*
Polyclonal Human IgGN/AHumanIgGBE0092N/A
Mouse IgG2c Isotype Control, Anti-Dengue VirusDV5-1MouseIgG2c, ΚBE0366N/A
Mouse IgG1 Isotype Control, Unknown SpecificityMOPC-21MouseIgG1, ΚBE0083BP0083*
Mouse IgG2a Isotype Control, Unknown SpecificityC1.18.4MouseIgG2a, ΚBE0085BP0085*
Mouse IgG2b Isotype Control, Unknown SpecificityMPC-11MouseIgG2b, ΚBE0086BP0086*
Polyclonal Mouse IgGN/AMouseIgGBE0093N/A
Polyclonal Rabbit IgGN/ARabbitIgGBE0095N/A
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-TrinitrophenolTNP6A7RatIgG1, ΛBE0290BP0290*
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Horseradish PeroxidaseHRPNRatIgG1, ΚBE0088BP0088*
Rat IgG2a Isotype Control, Anti-Trinitrophenol2A3RatIgG2a, ΚBE0089BP0089*
Rat IgG2b Isotype Control, Anti-Keyhole Limpet HemocyaninLTF-2RatIgG2b, ΚBE0090BP0090*
Polyclonal Rat IgGN/ARatIgGBE0094N/A
Polyclonal Syrian Hamster IgGN/ASyrian HamsterIgGBE0087BP0087*



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