用於小鼠的 mNSET 設備 60010 非手術胚胎移植說明

處理

設備僅(jin) 限一次性使用。使用後丟(diu) 棄。

在 mNSET 胚胎移植之前

為(wei) 了生產(chan) 用於(yu) 移植的小鼠胚胎和作為(wei) 受體(ti) 的假孕雌性，使用了標準的轉基因方法。¹按照標準的轉基因程序與(yu) 雄性和雌性小鼠交配。如果需要，女性捐贈者可以進行超數排卵。胚胎在 EmbryoMax® KSOM 培養(yang) 基 (Millipore#MR-106-D) 或所需培養(yang) 基中孵育。胚胎應在 mNSET 轉移當天交配後 3.5 天（3.5 dpc）；受體(ti) 雌性小鼠在 mNSET 轉移當天應為(wei) 2.5 dpc。

mNSET 演示視頻

快速程序和完整程序演示視頻可在此處查看和下載。快速程序視頻演示了使用 mNSET™（非手術胚胎和精子移植）小鼠 60010 設備如何輕鬆完成小鼠子宮胚胎移植。完整程序視頻詳細介紹了整個(ge) 設置和準備，直至實際程序結束.

胚胎移植程序

1. 將 15μl 培養(yang) 基滴到 60 mm 組織培養(yang) 皿（Falcon 353002 或類似物）的蓋子上。

2. 使用標準胚胎處理移液器將 12–20 個(ge) 囊胚裝入培養(yang) 基中。 （注意：要移植的胚胎的最佳數量將根據小鼠品係和胚胎接受的操作而有所不同。）

3. 將 mNSET 設備放在已設置為(wei) 1.8μl 的 P-2 移液器上。（推薦的移液器是移液器Rainin Classic PR2，0.1-2μl或Gilson Pipetman P2，0.2-2μl。

4.按下移液器柱塞到第一停止，將mNSET裝置的下端放入培養(yang) 基中，然後慢慢將胚胎拉入下端。從(cong) 介質中取出 mNSET 設備下端。

5.小心地將移液器設置為(wei) 2.0μl，以在mNSET下端產(chan) 生一個(ge) 小氣泡，以幫助確保胚胎在插入鼠標期間留在設備下端內(nei) 。輕輕地將裝有吸頭的移液器放在一邊（靠近籠子），以便在步驟#9中使用。避免推擠 mNSET 下端。

6.將未麻醉的受體(ti) 雌性放在帶有金屬架的籠子頂部，讓鼠標“抓住"籠子杆表麵。用拇指和食指抓住尾巴的根部，將尾巴向上傾(qing) 斜，同時用手的另一邊輕輕按壓尾巴的根部。（見下圖。