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用金納米粒子標記: 分離和分離金納米粒子偶聯物

更新時間:2023-05-19      點擊次數:666

凝膠過濾是分離金納米粒子標記結合物的最佳方法。

透析會(hui) 產(chan) 生更多變化的結果;在我們(men) 的實驗室中,嚐試通過透析將未結合的金納米粒子與(yu) 蛋白質和抗體(ti) 結合物分離,導致金降解,有時還會(hui) 導致蛋白質大量損失;因此,我們(men) 不推薦通過透析來分離偶聯物。

膜離心可能有用,特別是在標記非常大的蛋白質時;截留分子量為(wei) 50,000 或 100,000 的微量濃縮器將允許 undecagold 和 Nanogold® 穿過膜。


選擇您的凝膠過濾介質

層析介質 (14k)

選擇一種凝膠,它可以最好地分離金結合物和過量存在的組分:這將是一種凝膠,其中結合物的 MW 接近 MW 分級範圍的頂部,過量的試劑(無論是金納米顆粒或未標記的較小分子)接近該範圍的底部。注意:如果您擔心聚集的可能性,請選擇 MW 範圍上限明顯高於(yu) 金納米粒子偶聯物 MW 的凝膠。


Nanogold® 標記的 Fab' 片段的分離示例如下所示:

Nanogolf-Fab' (11k) 的色譜圖

所需產(chan) 物(灰色陰影)與(yu) 較大的 F(ab') 2綴合物和過量未結合的 Nanogold® 分離。要獲得更高的純度,應將 12-14 級分合並並再次分離。




要對凝膠或印跡進行染色以獲得清晰、快速的肉眼結果:

  • 銀增強方案:
    使用 LI Silver 對 Nanogold® 標記的分子進行凝膠染色

  • 使用GoldEnhance Blots
    增強 黃金 在許多情況下,黃金顯影劑優(you) 於(yu) 白銀。



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