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VitroGel 水凝膠的多種 3D 細胞培養方法和應用

更新時間:2023-04-25      點擊次數:1264

使用 VITROGEL 水凝膠的多種細胞培養方法

XENO-FREE 生物功能 VitroGel 水凝膠係統適用於(yu) 許多 3D 細胞培養(yang) 和應用。選擇“即用型"水凝膠係統以優(you) 化配方和簡化操作流程,或選擇高濃度水凝膠係統,通過“混合搭配"和調整水凝膠來創建定製的微環境。有多種方法可以使用我們(men) 的水凝膠係統來滿足許多研究需求。為(wei) 了展示我們(men) 水凝膠的靈活性,我們(men) 列出了五種流行的可以使用我們(men) 的水凝膠進行的細胞培養(yang) 方法:3D 細胞培養(yang) 、2D 水凝膠塗層、靜態懸浮培養(yang) 、水凝膠細胞珠和作為(wei) 可注射載體(ti) 。這五種培養(yang) 方法適用於(yu) 我們(men) 所有的即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 係統。用這些方法培養(yang) 的細胞可以很容易地用用於(yu) 下遊分析或傳(chuan) 代培養(yang) 的VitroGel® 細胞回收溶液。

3D 細胞培養(yang)

VitroGel 係統是 3D 細胞培養(yang) 的理想選擇。隻需在室溫下將 VitroGel 溶液與(yu) 細胞懸液混合,轉移到培養(yang) 板並添加頂部培養(yang) 基,細胞就可以進行孵育了。這種 3D 培養(yang) 方法進行了完整的細胞封裝,從(cong) 而增強了細胞-水凝膠基質的相互作用。許多下遊分析,如藥物篩選、免疫熒光分析和細胞毒性測定,可以直接在水凝膠中進行。

二維水凝膠塗層

2D 水凝膠塗層方法是在傳(chuan) 統 2D 培養(yang) 和 3D 細胞封裝培養(yang) 之間架起橋梁。通過在室溫下將 VitroGel 溶液與(yu) 細胞培養(yang) 基混合並轉移到培養(yang) 板中,VitroGel 可以在培養(yang) 板底部塗上一層厚厚的水凝膠。細胞可以直接添加到水凝膠的頂部。二維水凝膠塗層方法允許細胞與(yu) 功能性水凝膠物質相互作用/浸入功能性水凝膠物質中,並保持表麵暴露於(yu) 頂部介質。當細胞在水凝膠表麵遷移/聚集時,可能會(hui) 快速形成細胞球體(ti) 。2D 水凝膠塗層方法可用作與(yu) 3D 細胞培養(yang) 方法相結合的替代共培養(yang) 方法:將一種細胞類型封裝在水凝膠中用於(yu) 3D 培養(yang) ,然後在水凝膠頂部添加另一種類型的細胞作為(wei) 2D 塗層培養(yang) 。二維塗層 VitroGel 也可以成為(wei) 研究細胞侵襲、血管生成測定和逐層共培養(yang) 的強大係統。除了 2D 厚凝膠塗層外,VitroGel 還可以稀釋用於(yu) 薄凝膠塗層方法。

靜態懸浮文化

3D 靜態懸浮培養(yang) 方案是 VitroGel 水凝膠係統的培養(yang) 方法。通過簡單地將 VitroGel 溶液和細胞混合形成軟水凝膠,研究人員可以進一步直接將水凝膠-細胞混合物與(yu) 額外的培養(yang) 基混合,製成水凝膠-細胞懸浮液。水凝膠基質分散在細胞培養(yang) 基中可以增加整個(ge) 混合物的粘度,幫助細胞在沒有強烈攪拌的情況下保持懸浮狀態。3D 靜態懸浮培養(yang) 易於(yu) 製備,可靈活調整各種細胞類型和接種密度的最終粘度,隻需改變水凝膠和細胞培養(yang) 基的混合比例即可。例如,研究人員可以使用固定的2:1(水凝膠溶液:細胞,v/v)配製水凝膠-細胞混合物,然後將其與(yu) 細胞培養(yang) 基按1:1至1:10的比例混合,得到不同粘度的最終的水凝膠細胞懸液。這種培養(yang) 方法可以很容易地用於(yu) 實驗室規模或大型工業(ye) 規模的細胞培養(yang) 放大。研究實驗室不需要花哨的生物反應器或昂貴的培養(yang) 容器。我們(men) 將其用於(yu) 幹細胞球體(ti) HEK293 球體(ti) 的生成。該方法也適用於(yu) 我們(men) 所有的即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 係統。VitroGel 靜態懸浮培養(yang) 產(chan) 生的細胞可通過離心輕鬆收集。

水凝膠細胞珠

作為(wei) 一種可注射的水凝膠係統,VitroGel 具有剪切稀化和快速恢複流變特性。水凝膠溶液可以與(yu) 細胞混合形成軟水凝膠,然後可以將其作為(wei) 液滴添加到細胞培養(yang) 基中,形成水凝膠細胞珠。這種培養(yang) 方法不僅(jin) 將細胞封裝在水凝膠基質中以增強細胞-基質相互作用,而且還允許整個(ge) 水凝膠-細胞珠懸浮在細胞培養(yang) 基中以實現最佳培養(yang) 基滲透。研究人員可以通過改變添加到培養(yang) 基中的液滴體(ti) 積來調整水凝膠珠的大小。對於(yu) 需要牢固附著才能生長的細胞,例如間充質幹細胞 (MSC),這種水凝膠細胞珠培養(yang) 方法是替代微載體(ti) 進行 3D 細胞放大的方法。由於(yu) 優(you) 良的介質和氧氣滲透性,在水凝膠珠中培養(yang) 的細胞可以保持長期培養(yang) 的高細胞活力。該方法適用於(yu) 我們(men) 所有的即用型 VitroGel 和高濃度 VitroGel 係統。VitroGel 水凝膠細胞珠培養(yang) 產(chan) 生的細胞可以通過 VitroGel 細胞回收溶液收集。

注射載體(ti)

VitroGel 是一種出色的動物注射載體(ti) 。在通過注射器注射等機械剪切力作用下,水凝膠發生凝膠-溶膠轉變,成為(wei) 自由流動狀態。然而,一旦剪切力停止,水凝膠的機械強度可以迅速恢複,並發生溶膠-凝膠轉變,再次成為(wei) 水凝膠狀態。憑借這種可注射特性,VitroGel 可用於(yu)  細胞治療的體(ti) 內(nei) 細胞/藥物遞送或控釋。隻需在室溫下將水凝膠溶液與(yu) 細胞/化合物混合,水凝膠即可在 20 分鍾內(nei) 用於(yu) 注射。除了即用型 VitroGel,研究人員還可以使用 VitroGel 高濃度水凝膠來獲得不同水凝膠強度的可注射水凝膠。


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