Serotonin (5-HT) ELISA Kit

預包被 96 孔微孔板

標準

標準稀釋緩衝(chong) 液

洗滌緩衝(chong) 液

檢測試劑 A

檢測試劑 B

稀釋劑 A

稀釋劑 B

TMB 底物

停止解決(jue) 方案

封板機

37°C 培養(yang) 箱

多通道和單通道移液器以及無菌移液器吸頭

噴瓶或自動洗板機

1.5 毫升管

蒸餾水

吸收性濾紙

100 ml 和 1 L 量筒

酶標儀(yi) （波長：450 nm）

ELISA 搖床

1） 標準品：用推薦體(ti) 積的標準稀釋劑緩衝(chong) 液製備標準品，製成標準溶液。然後按照方案中的說明，使用標準稀釋劑緩衝(chong) 液對標準溶液進行連續稀釋。

2） 洗滌緩衝(chong) 液：按照實驗步驟中的說明，用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩衝(chong) 液。

3） 檢測試劑製備：計算所需工作溶液的總體(ti) 積。分別用稀釋劑 A 和稀釋劑 B 以 1：100 的比例稀釋檢測試劑 A 和檢測試劑 B。

1） 設定標準、測試樣品和對照孔。

2） 將 50 μl 稀釋的標準品分裝到標準孔中。

3） 將 50 μl 標準稀釋液緩衝(chong) 液分裝到對照（零）孔中。

4） 將 50 μl 稀釋樣品分裝到樣品孔中。

5） 立即向每個(ge) 孔中分裝 50 μl 檢測試劑 A。在 37 °C 下孵育 1 小時。

6） 洗滌 3 次。

7） 將 100 μl 檢測試劑 B 分裝到每個(ge) 孔中。在 37 °C 下孵育 30 分鍾。

8） 洗滌 5 次。

9） 將 90 μl TMB 底物分裝到每個(ge) 孔中。在 37 °C 下孵育 10-20 分鍾。

10） 分裝 50 μl 終止液。

11） 測量 450 nm 處的 OD。

使用前，將試劑盒組分和樣品平衡至室溫 （18 - 25 °C）。建議為(wei) 每個(ge) 測試繪製一條標準曲線。

1. 在預塗板上分別設置標準、測試樣品和對照（零）孔，然後記錄它們(men) 的位置。建議至少一式兩(liang) 份測量每個(ge) 標準品和樣品。

2. 將 50 μL 每種標準品、對照品和樣品加入適當的孔中。

3. 取下蓋子，丟(diu) 棄液體(ti) 。

4. 立即分裝 50 μl 檢測試劑 A 工作溶液。用蓋子密封板，並在 37°C 下孵育 1 小時。

5. 取下蓋子並丟(diu) 棄溶液。用 1X 洗滌緩衝(chong) 液洗滌板 3 次。

6. 向每個(ge) 孔中加入 100 μL 檢測試劑 B 工作溶液，密封並在 37°C 下孵育 30 分鍾。

7. 棄去溶液，並按照上一步的說明用洗滌緩衝(chong) 液洗滌板 5 次。

8. 將 90 μl TMB 底物分裝到每個(ge) 孔中。用蓋子密封板，並在 37°C 下孵育 10-20 分鍾。避免暴露在光線下。孵育時間僅(jin) 供參考，最佳時間應由最終用戶決(jue) 定。不要超過 30 分鍾。

9. 向每個(ge) 孔中加入 50 μL 終止液。立即在 450 nm 處讀取。