SuperQuick RT MasterMix（For Real-time PCR）

本產(chan) 品是專(zhuan) 為(wei) Real-time RT-PCR 而研發的快速逆轉錄試劑混合液。5× SuperQuick RT MasterMix中包含SuperQuickRT逆轉酶、 Rnase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、RT Buffer 等從(cong) RNA模板逆轉錄成 cDNA 第 一鏈所需的全部試劑。該產(chan) 品的逆轉錄效率高，可對少量 RNA 模板進行良好 的逆轉錄反應，15 分鍾即可完成熒光定量模板 cDNA***鏈合成。另外，逆轉 錄反應溫度可以提高到 50℃，可通讀 GC含量高和二級結構複雜的 RNA模板。 本試劑盒操作十分方便快捷，僅(jin) 需加入 RNA 模板和水即可進行逆轉錄反應， 特別適合於(yu) 高通量檢測。

產(chan) 品特點1．簡便：即用型逆轉錄 Mix，隻需加入 RNA 模板和水，便可進行反應。2．快速：15 分鍾完成 cDNA 第一鏈合成。3．反轉錄效率高：反轉錄效率高於(yu) 90%。4．靈敏度高：pg 級模板也可以得到高質量的 cDNA。5．通讀複雜模板：GC 含量高和二級結構複雜模板。注意事項1．在操作過程中應避免 Rnase 汙染，防止 RNA 降解或實驗中的交叉汙染，建議操作人員帶口罩和一次性手套並經常更換手套，使用專(zhuan) 門的儀(yi) 器和耗材。2．逆轉錄體(ti) 係配製在冰上進行操作，防止 RNA 發生降解。試劑盒的 MasterMix使用後盡快置於(yu) -20℃保存，並盡量避免反複凍融。3．反應體(ti) 係可倍比放大，10ul 反應體(ti) 係可最大使用 1ug 總 RNA。4．對於(yu) 二級結構複雜的 RNA 模板，建議在操作步驟之前，將模板 RNA 在 65℃孵育 5min 立刻置於(yu) 冰上，短暫離心後進行下一步操作。使用方法1．將模板 RNA 在冰上解凍；將試劑盒組分在室溫解凍後立刻置於(yu) 冰上，使用前將每種溶液渦旋振蕩混勻，並經短暫離心後使用。2．根據以下表格配製反應體(ti) 係（反應液配製請在冰上進行），渦旋震蕩混勻，短暫離心，使管壁上的溶液收集到管底。

注意：1） 如果總RNA量大於(yu) 1ug，請按比例擴大反應體(ti) 係。2）5×SuperQuick RT MasterMix中含有Oligo(dT)、Random primer、RnaseInhibitor、dNTPs、RT Buffer等。3．42 ℃孵育15分鍾。注意：對於(yu) 二級結構複雜或GC含量高的模板，可以提高逆轉錄溫度至50℃，增強逆轉錄效率。4．85℃孵育5分鍾，使逆轉錄酶失活。5．短暫離心後置於(yu) 冰上，再進行後續Real-time PCR檢測，如果需要長時間保存，請置於(yu) -20℃。注意：進行Real-time PCR反應時，逆轉錄產(chan) 物的加量應不超過PCR反應總體(ti) 積的1/10。