diagnocine MCDB 153 Medium

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MCDB 153 培養(yang) 基
，含微量元素、L-穀氨酰胺和 28mM HEPES 緩衝(chong) 液，
不含碳酸氫鈉
粉末

產(chan) 品代碼：HM-AT135


產(chan) 品描述：

MCDB 培養(yang) 基是為(wei) 培養(yang) 特定細胞類型而開發的，無需血清補充劑。每種 MCDB 培養(yang) 基都針對特定的細胞類型進行配製。MCDB 105 和 110 被配製用於(yu) 人類二倍體(ti) 細胞的快速克隆生長正常。MCDB 131 培養(yang) 基最初是為(wei) 人類微血管內(nei) 皮細胞 (HMVEC) 的克隆生長而開發的。MCDB 151、201 和 302 最初是為(wei) 人類角質形成細胞、雞胚成纖維細胞和 CHO 細胞的克隆生長而開發的。

AT135 是含有微量元素、L-穀氨酰胺和 28mM HEPES 緩衝(chong) 液的 MCDB 153。HEPES 是一種兩(liang) 性離子緩衝(chong) 液，在 37ºC 時的 pKa 為(wei) 7.3，可防止在培養(yang) 開始時傾(qing) 向於(yu) 發生的初始 pH 升高，並增加培養(yang) 基的緩衝(chong) 能力。建議用戶查閱文獻以獲取有關(guan) 針對不同細胞係特定的培養(yang) 基補充和生理生長要求的建議。

方向：

1. 將 17.7gms 懸浮在 900ml 組織培養(yang) 級水中，持續溫和攪拌直至粉末*溶解。不要加熱水。

2. 在 1 升培養(yang) 基中加入 1.176 克碳酸氫鈉粉末 (TC230) 或 15.7 毫升 7.5% 碳酸氫鈉溶液 (TCL013)，攪拌至溶解。

3. 使用 1N HCl 或 1N NaOH 將 pH 值調整到低於(yu) 所需 pH 值的 0.2 - 0.3 pH 單位，因為(wei) 在過濾過程中 pH 值會(hui) 升高。

4. 用組織培養(yang) 級水定容至1000ml。

5. 通過孔隙率為(wei) 0.22 微米或更小的無菌膜過濾器過濾，立即對培養(yang) 基進行消毒，使用正壓而不是真空，以盡量減少二氧化碳的損失。

6. 根據需要在無菌條件下添加無菌補充劑，並將所需數量的無菌培養(yang) 基分配到無菌容器中。

7. 將液體(ti) 培養(yang) 基儲(chu) 存在 2-8°C 和避光處直至使用。

需要但未提供的材料：

• 組織培養(yang) 級水（TCL010）

• 碳酸氫鈉粉（TC230）

• 碳酸氫鈉溶液，7.5% (TCL013)

• 1N 鹽酸 (TCL003)

• 1N 氫氧化鈉 (TCL002)

• 胎牛血清 (RM1112/RM10432)

質量控製：

• 外觀：灰白色至乳白色均勻粉末。

• 溶解度：14.9 gms/L 的澄清溶液。

• 不含碳酸氫鈉的 pH 值：5.10 - 5.70

• 碳酸氫鈉的 pH 值：6.40 - 7.00

• 不含碳酸氫鈉的滲透壓: 300.00 - 340.00

• 碳酸氫鈉滲透壓：320.00 - 360.00

• 培養(yang) 反應：通過分析細胞的形態來定性評估培養(yang) 基的生長促進能力，並通過估計細胞計數並通過至少三個(ge) 傳(chuan) 代培養(yang) 將其與(yu) 對照培養(yang) 基進行比較來定量評估培養(yang) 基的生長促進能力。

• 內(nei) 毒素含量：NMT 5EU/ml

儲(chu) 存和保質期：

1. 所有粉狀培養(yang) 基和製備好的液體(ti) 培養(yang) 基應儲(chu) 存在 2-8°C。在有效期內(nei) 使用。盡管有上述推薦的儲(chu) 存條件，某些粉末介質在某些情況下可能會(hui) 出現一些變質/降解的跡象。這可以通過顏色變化、外觀變化和顆粒物質的存在以及溶解後的混濁度來表示。

2. 不推薦製備濃縮培養(yang) 基，因為(wei) 遊離堿氨基酸和溶解度低的鹽複合物可能在濃縮培養(yang) 基中沉澱。

3. 製備培養(yang) 基的 pH 值和碳酸氫鈉濃度是影響細胞生長的關(guan) 鍵因素。這也受所用培養(yang) 基量和培養(yang) 容器體(ti) 積（表麵積與(yu) 體(ti) 積比）的影響。例如，在大瓶中，如 Roux 瓶，隨著大量二氧化碳的釋放，pH 值會(hui) 明顯升高。因此，必須為(wei) 每種細胞類型確定 pH、碳酸氫鈉濃度、表麵積與(yu) 體(ti) 積比的最佳條件。我們(men) 建議嚴(yan) 格監測 pH 值。如果需要，可以使用無菌 1N HCl 或 1N NaOH 或通過在二氧化碳中鼓泡來調節 pH 值。

4. 如果需要，可以在過濾滅菌之前或之後將補充劑添加到培養(yang) 基中，並遵守無菌預防措施。培養(yang) 基的保質期取決(jue) 於(yu) 添加到培養(yang) 基中的補充劑的性質。

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