calzyme穀丙轉氨酶產品介紹

（L-丙氨酸:2氧代戊二酸氨基轉移酶；2.6.1.2穀丙轉氨酶（GPT）也稱為(wei) 丙氨酸氨基轉移酶。它催化以下反應:GPT L-丙氨酸+α-酮戊二酸-》丙酮酸+L-穀氨酸轉氨反應在中間代謝中起重要作用。轉氨酶的催化活性需要磷酸吡哆醛作為(wei) 輔酶。GPT存在於(yu) 許多動植物組織中，在哺乳動物的心髒和肝髒中活性尤其高。這種酶在哺乳動物組織中以兩(liang) 種不同的同工酶形式存在，線粒體(ti) 形式和細胞質形式。來自豬心的GPT已被廣泛研究。它的分子量為(wei) 10萬(wan) 。

在pH 7.5和25℃的磷酸鉀緩衝(chong) 液中，催化1微摩爾α-酮戊二酸轉化為(wei) L-穀氨酸的酶量

由NADH氧化引起的340 nm處吸光度的降低與(yu) GPT的催化活性成正比。

組分：

0.1 M磷酸鉀緩衝(chong) 液，pH 7.5。

緩衝(chong) 液中的1.15M L-丙氨酸（103毫克/毫升）。

緩衝(chong) 液中的0.31Mα-酮戊二酸（45毫克/毫升）。

蒸餾水中的0.008 M NADH二鈉鹽（5毫克/毫升）。準備新鮮的。

乳酸脫氫酶（LDH），緩衝(chong) 液中250 U/ml。化驗前立即準備新鮮樣品。

酶（GPT）溶液。在緩衝(chong) 液中製備，使最終濃度為(wei) 0.1-0.2 U/ml。必須在化驗前立即製備新鮮樣品。

PROCEDURE

1. 將分光光度計（配有條形記錄儀(yi) 和溫度控製裝置）設置在340 nm和25°c。

2.向比色皿移液管中加入所示量的以下試劑: 左旋丙氨酸2.60毫升 α-酮戊二酸鹽0.10毫升 NADH 0.10毫升 乳酸脫氫酶0.10毫升 混合並在分光光度計中孵育5分鍾以達到溫度平衡，然後記錄340 nm處的空白率。

3.通過向比色皿中加入0.1毫升酶（GPT）溶液來啟動反應。

4.記錄5-8分鍾內(nei) 340 nm處吸光度的下降率。

5.計算(delta)E340nm納米/分鍾