celltechgen:免疫測定試劑和試劑盒描述

celltechgen:免疫測定試劑和試劑盒——用於(yu) 流式細胞術的大鼠 CLCN6 珠基檢測套裝

貨號：CTG-BAR1133

試劑盒成分

2 ml 針對大鼠 CLCN6 的單克隆抗體(ti) ，R-PE 綴合。

2 ml 抗 R-PE 磁珠。

1 ml 微珠釋放試劑和 1 ml 終止緩衝(chong) 液

10 毫升稀釋緩衝(chong) 液。

該試劑盒旨在使用磁珠磁性標記來分離和檢測大鼠 CLCN6 ⁺細胞。首先，用與(yu) R-PE和抗R-PE磁珠綴合的大鼠CLCN6單克隆抗體(ti) 標記細胞，在磁力柱上陽性選擇大鼠CLCN6 ⁺細胞，收集用於(yu) 進一步流式細胞術分析。磁珠釋放試劑和終止緩衝(chong) 液可用於(yu) 將帶有抗體(ti) -R-PE 的細胞從(cong) 磁珠中釋放出來。

目標特征

符號：大鼠 CLCN6

基因ID：295586

Uniprot 條目：D4A3H5

蛋白質名稱： 氯轉運蛋白 6       

生物體(ti) ：褐家鼠（大鼠）

容量        

1 X 10 ⁹單元

公式  

所有組分均以含有穩定劑和 0.05% 疊氮hua鈉的緩衝(chong) 液形式提供。

儲(chu) 存與(yu) 使用      

避光保存在 2−8 ^o C 下。不要冷凍。有效期標注在小瓶標簽上。該產(chan) 品僅(jin) 供研究，不可用於(yu) 診斷程序。

通用協議

檢測試劑盒用於(yu) 分離和檢測具有特定抗原的靶細胞。篩選過程是用針對特定抗原的單克隆抗體(ti) 直接對細胞進行磁性標記，並與(yu) R-PE 和 Anti-R-PE 磁珠綴合，然後將標記的細胞保留在磁柱上，然後將目標細胞篩選出來。被釋放並收集以進行進一步的流式細胞術分析。

1. 樣品製備

• 當使用抗凝外周血或血沉棕黃層時，應通過密度梯度離心分離外周血單核細胞 (PBMC)。

• ^{要在密度梯度分離後去除血小板，請將細胞沉澱重懸於(yu) 緩衝(chong) 液中，並在 20 o} C下以 200 x g 離心 10−15 分鍾。小心吸出上清液。重複洗滌步驟。

• 當處理組織或溶解的血液時，使用標準方法製備單細胞懸浮液。

• 死細胞可能會(hui) 非特異性地與(yu) 磁珠結合。要去除死細胞，我們(men) 建議使用密度梯度離心或死細胞去除試劑盒。

• 保持細胞低溫，並使用預冷的溶液。

2. 磁性標簽

• 下麵給出的磁性標記體(ti) 積最多適用於(yu) 10 ⁷個(ge) 細胞。當使用少於(yu) 10 ^{7 個(ge)} 細胞時，請使用所示的相同體(ti) 積。當使用更高的細胞數量時，請相應地擴大所有試劑體(ti) 積和總體(ti) 積。

• 應滴定一抗染料偶聯抗體(ti) 以確定最佳染色稀釋度。染色不應增加陰性群體(ti) 的熒光強度。

1)    計算細胞數量。

2)     300×g離心細胞懸液10分鍾。全吸出上清液。

3)每 10    ^{7 個(ge)} 總細胞 在 80 µL 緩衝(chong) 液中重懸細胞沉澱。

4)    加入 20 µl PE 偶聯一抗，充分混勻，並在 2−8 ^o C下避光孵育 10 分鍾。

5)每 10    ^{7 個(ge)} 細胞 添加 1−2 mL 緩衝(chong) 液，洗滌細胞以去除未結合的一抗，並在 300×g 下離心 10 分鍾。

6)全吸出上清液，並在每 10    ^{7 個(ge)} 總細胞 80 µL 緩衝(chong) 液中重懸細胞。

7)每 10    ^{7 個(ge)} 總細胞 添加 20 µL 抗 PE 磁珠。

^{8) 充分混合並在 2−8 o} C下孵育 15 分鍾。

^{9) 每10 7 個(ge)} 細胞加入1~2 mL緩衝(chong) 液洗滌細胞，300×g離心10分鍾，全吸出上清。

10)在 500 µL 緩衝(chong) 液中重懸最多 10 ^{7 個(ge)} 細胞。注意：對於(yu) 更高的細胞數量，請相應地增加緩衝(chong) 液體(ti) 積。

11) 進行磁分離。

3. 檢測目的細胞的正選

1) 將色譜柱置於(yu) 合適的分離器的磁場中。 

2) 用適量的緩衝(chong) 液衝(chong) 洗來準備柱。

3) 將細胞懸液塗在柱上。

4) 收集通過的未標記細胞，並用適量緩衝(chong) 液洗滌柱。執行洗滌步驟三次。          

5) 從(cong) 分離器中取出柱並將其放置在合適的收集管上。

6) 將適量的緩衝(chong) 液移至柱上並釋放靶細胞以進行進一步的流式細胞分析。

Celltechgen 實驗室是一家先進的醫學檢測實驗室服務，提供用於(yu) 疾病和健康狀況的診斷、篩查或評估的全套檢測。產(chan) 品覆蓋生化產(chan) 品、蛋白質、抗體(ti) 、肽、小分子、標記探針染料和試劑盒產(chan) 品組合，為(wei) 生命科學研究人員提供了用於(yu) 生物標誌物目標識別/驗證、大容量篩選分析、基因表達分析、核酸檢測、蛋白質生物化學和檢測的工具，以及細胞和免疫學分析。