cortecnet的大腸杆菌蛋白表達簡介

細菌中的蛋白質表達是迄今為(wei) 止製備穩定同位素富集蛋白質樣品的常用方法。大腸杆菌是表達重組蛋白常用的生物體(ti) ，是一種培養(yang) 時間短的宿主。大腸杆菌能夠使用簡單的分子技術進行直接的基因操作，並且細胞對氘表現出良好的耐受性，從(cong) 而可以使用13 C、 15 N 和2 H

在厭氧條件下，大腸杆菌可以使用葡萄糖、乙酸鹽和甘油作為(wei) 其碳源以及銨鹽作為(wei) 其氮源來合成所有 20 種必需氨基酸。使用標記的基本介質試劑，例如氧化氘、 15 N 銨鹽、 13 C 6、D 7或13 C 6 /D 7標記的葡萄糖，可以直接生產(chan) 均勻標記的蛋白質樣品。

使用相應的標記試劑獲得均勻的標記

I SOGRO 是一種源自藻類裂解物的複雜粉末狀豐(feng) 富培養(yang) 基，旨在增強細菌中的蛋白質表達。 ISOGRO 粉末具有13 C、 15 N 和2 H 標記的各種組合，可用作獨立培養(yang) 基或基本培養(yang) 基的補充，以提高蛋白質產(chan) 量。

A。 p38 生長的 SDS-PAGE。數據由美國大學化學/生物化學係 Jeffrey W. Peng 博士提供美國印第安納州聖母院。 b. pLysS 中的心肌肌鈣蛋白 cTnC(1-89)。細胞在 37°C 搖瓶中生長。紅色曲線是 ISOGRO 補充的最小介質，黑色曲線是單獨的最小介質。

如果使用大腸杆菌無法成功進行蛋白質表達，則可以考慮其他選擇，例如昆蟲細胞、哺乳動物細胞或無細胞表達係統。